Отчет о производственной практике в Министерстве сельского хозяйства Российской Федерации

МИНИСТЕРСТВО  СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ  БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«РЯЗАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ  АГРОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ  ИМЕНИ П. А. КОСТЫЧЕВА»

 

Факультет ветеринарной медицины и биотехнологии

Кафедра биологии и разведения животных

 

 

 

ОТЧЕТ

о производственной практике

студента 32 группы

специальности 020803.65 – Биоэкология

Ризаевой Алены Юрьевны

 

 

 

 

 

 

 Руководитель практики

 от ФГУ «РСтаЗР»:

 директор,

 В.Б.Храмцов

 

 

 Руководитель практики

 от ФГБОУ ВПО РГАТУ:

 доктор биологических наук,

 доцент Новак Александра Иановна

 

 

 

 

 

 

 

Рязань – 2012

Содержание

 

          Введение…………………………………………………………3

1.Характеристика организации…………………………………..5

2.Материалы и методы исследований…………………………..7

3.Результаты исследований……………………………………..11

4.Заключение и выводы…………………………………………14

5.Приложение……………………………………………………15

6.Список использованной литературы…………………………26

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Введение

 

 

В настоящее время особую актуальность приобретают нехимические, в первую очередь биологические  технологии защиты растений. Естественные природные компоненты позволяют  при правильном применении значительно  сократить, а в некоторых случаях  полностью исключить применение ядохимикатов. 
Спектр таких средств весьма широк. Это хищные и паразитирующие насекомые, клещи, нематоды, а также феромонные и микробиологические препараты. 

Лаборатория биологических  и других нехимических средств защиты растении, где была пройдена производственная практика занимается производством и внедрением биологических средств защиты растений, агрохимикатов, и препаратов для рекультивации почв. Лабораторией производятся высокоэффективные биологические средства защиты растений. Все препараты хорошо себя зарекомендовали и входят в технологию выращивания сельскохозяйственных и цветочных культур и получения экологически чистой продукции в крупных тепличных хозяйствах.

Основные направления  деятельности компании включают разработку и производство:

	биотехнологических препаратов для защиты растений от болезней
	кормовых добавок и незаменимых аминокислот для сельскохозяйственных животных
	пищевых аминокислот и натуральных пищевых консервантов

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1.Характеристика организации

 

1. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору Федеральное Государственное Учреждение «Российская станция защиты растений» (Референтный центр Россельхознадзора)
2. Московская обл., г. Раменское, ул. Нефтегазосъемки, д. 11/41

Факс: (246) 3-45-62 Телефон: (095) 556-24-73

3. Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
4. Руководитель организации: Хромцов Владимир Борисович

Заместитель руководителя: Сухова Виктория Леонидовна 
Отдел Административно-хозяйственный (АХО) главный инженер: Докукин Александр Яковлевич 
Лаборатория химико-токсикологических исследований: 
Заведующий лабораторией Борисов Геннадий Степанович 
Главные специалисты: Солдатова Наталья Михайловна

Шмелева Наталья Александровна 
Лаборанты: Грибанов Владимир Юрьевич и Давыдов Сергей Юрьевич 
Лаборатория биологических и других нехимических средств защиты растений: 
Заведующая лабораторией: Козырева Ирина Вячеславовна 
Главный специалист: Резникова Галина Вячеславовна 
Специалист: Козлова Галина Алексеевна 
Микробиологи: Бирюкова Нина Николаевна, Казакова Наталья Дмитриевна 
Энтомологи: Рябкова Наталья Филиповна

 

 

5. Правительство Российской Федерации
6. Тепличные хозяйства разной формы собственности, физические лица

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2.Материалы и методы экологических исследований

 

 

1. Объект исследования: бактерия Pseudomonas fluorescens, штамм АР-33, культуральная жидкость (титр не менее 2х10⁹ клеток/мл).
2. Лабораторное оборудование: пробирка, лакмусовая бумажка, предметное стекло, горелка, петля, пинцет, красители, микроскоп, чашки Петри, шпателем Дригальского, термостат, ферментер(рис.4).
3. Методика исследований:

а) определение внешнего вида и цвета: пробу в количестве 5-10 см³ помещают в стерильные условия в пробирку и рассматривают при естественном свете.

б) Определение _рН препарата - 5 см³ препарата разбавляют в 40 см дистиллированной воды, суспензию размешивают и проводят измерения или

- на рН-метр с точностью измерения не более 0.1рН по инструкции к прибору.

- по лакмусовой бумажке.

в) окрашивание мазка, из культуры, выращенной на жидкой питательной среде.

Готовим обезжиренное предметное стекло: протираем его спиртом  и прожигаем в пламени горелки. Образец препарата (отобранный стерильно) тщательно перемешивают. Прокаливают петлю и опускают ее в средний слой препарата (в пламени горелки). На охлажденное предметное стекло петлей наносим каплю (мазок из колбы). Подсушиваем мазок над пламенем горелки, но, не опуская низко, чтобы не убить культуру (держим над пламенем мазком вверх). Фиксируют мазок для того, чтобы

- закрепить микробы на стекле,

- обезвредить культуру,

- убитые микробы лучше воспринимают окраску.

Фиксируем: берем стекло пинцетом и быстро проводим 1,2 раза через верхнюю часть горелки. Затем необходимо окрасить полученный мазок.

Метод окраски по Граму:

а) наносим генциан фиолетовый на мазок (покрыть весь) на 1-2 мин. Осторожно смываем краситель водой

б) наносим раствор Люголя на 2 мин.

в) затем, не промывая водой, смываем раствор Люголя, капаем спиртом 96% на 20-30 сек.

г) тщательно промываем водой

д) докрашиваем препарат фуксином в течение1-2 мин.

е) промываем водой, высушиваем на фильтровальной бумаге.

Затем микроскопируем при  помощи иммерсионной системы: на окрашенный препарат наносят каплю кедрового  масла. Pseudomonas fluorescens окрашиваются в розовый (красный) цвет - грам отрицательные.

Картина в микроскопе: бактерии палочковидной формы, цвет - розовый или красный. Если нет крупных сигаровидных палочек фиолетового цвета (бациллы), кокков и других посторонних включений, то мазок чистый.

Определение титра и чистоты препарата.

Титр- это количество жизнеспособных спор в 1 мл. препарата (по нормам не менее 2 млрд. спор/мл). Титр определяем методом серийных разведений с использованием агаризированной среды Кинга.

Среда Кинга: на 1 литр - пептон 20г.

                             - глицерин 10 мл.

                - магний сернокислый 1,5 г.

                - агар-агар 20г.

                                                 -  рН среды 7,3.

Готовим предварительно чашки  Петри следующим образом: разливаем  по стерильным чашкам среду Кинга. Чашки  подсушиваем в термостате 1 сутки  при t=36С^о . Берут из колбы пробу 1 мл., добавляют в колбу с 99 мл. дистиллированной воды, барбатируют. Это 2 разведение.

В пробирках со стерильной дистиллированной водой (по 9 мл) делаем 3,4,5,6,7,8 разведение:

 

3 4  5  6  7 8 разведение.

 

1 мл   1мл   1мл  1мл 1мл

Жидкость в пробирках  тщательно встряхивается, проба  берется из среднего слоя. Посев в чашки на среду делаем из 6, 7 и 8 разведения по 0,1 мл суспензии (в 2-3 повторностях). Помещают по 0,1 мл в центр каждой чашки (стерильно), затем стерильным стеклянным шпателем Дригальского распределяют по всей поверхности чашки. Втираем шпателем досуха. После посева чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат при t=28-30 С^о . Подсчет выросших колоний осуществляют через 24 -48 часа.

Подсчет:

В 6 разведении: около 200 колоний

В 7 разведении: около 20 колоний

В 8 разведении: около 2 колоний

Титр препарата около 2 млрд. колоний 

 T=(n/р) 10

n-число колоний (среднеарифметическое из 3-х чашек).

р-разведение.

Одновременно при подсчете колоний на чашках учитывается наличие  посторонней микрофлоры.

Другие методы исследования бактерии Pseudomonas fluorescens: хроматография, электрофорез.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. Результаты исследований

 

 

За время прохождении  практики была изучена методики определения  качества препарата бактерии Pseudomonas fluorescens, штамм АР-33(рис.1), методики приготовления красителей и реактивов. Так же было проведено окрашивание и последующее определение титра и чистоты препарата.

Проведено ознакомление с протоколом испытаний, с  методическим руководством по отбору образцов микробиопрепарата.

Изучен доклад с семинара Гавриша от 22 мая 2003 года на тему «Система защиты овощных культур от вредных  организмов».

Было проведено определение  радионуклидов цезия-137 и стронция-90.

Изучение грибков Beauveria bassiana и Metarhizium anisopliac

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Развитие микробиологического  метода в практике защиты растений началось на государственном уровне в середине 70-х годов. В те годы  это направление защиты считалось  очень перспективным,  и уровень  использования биопрепаратов планировался в пределах 10-12 млн. га. В 70-80-х годах  производитель биологических препаратов Бердский завод и завод “Прогресс” выпускали до 10 тыс. тонн микробиологических средств защиты растений. Препараты  широко применялись в сельском хозяйстве, лесном ведомстве, личных подсобных  хозяйствах. Но, несмотря на большие  перспективы, объем использования  биопрепаратов стабилизировался на уровне 2,8 млн. га   (Таблица 1).

Таблица 1- Площади применения микробиологических средств защиты растений (МСЗР) по годам.

 

Годы	План обработок	Фактически обработано
		Активный биометод		Сохранение полезной энтомофауны
		Всего	В т.ч. МСЗР
1971	960,7	936,9	438,3	225,8
1975	3158,8	3655,3	2249,7	1694,2
1980	9100,0	5319,0	2864,2	3831,4
1985	11017	6722,0	3800,7	5670,7
1990	14570,7	6244,5	3549,9	6133,4
1995		2559,6	1887,6	5211,2
2000		1102,4	963,7	4337,5
2002		1479,9	1267	6015,0