Изотонические растворы

2. Упаковка, маркировка

    Ампулы  нейтрального стекла АС-3 с раствором  упаковывают в коробки из картона  по 10 штук. В каждую коробку вкладывают нож для вскрытия ампул. На коробку  наклеивают этикетку из бумаги этикетной  или писчей. Далее упаковывают  в транспортную тару. 

    Оценка качества:

    1. Проверка герметичности ампул

    После стерилизации контроль герметичности  ампул проводится путем немедленного полного погружения ампул в кассетах в емкость с раствором метиленового синего на 20-25 минут, создают давление 100±20 кПа, затем его снижают. Ампулы с попавшим подкрашенным раствором  бракуют. Герметичные ампулы упаковывают.

    2. Стандартизация

    1  Подлинность (идентификация).

    1)  5 мл испытуемого образца упаривают до объема 1 мл. Полученный раствор дает реакцию на натрий.

    2)  К 2 мл испытуемого образца прибавляют 0,5 мл кислоты азотной разведенной, 0,5 мл раствора серебра нитрата. Образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в кислоте азотной разведенной и растворимый в растворе аммиака.

    2  Количественное определение.

    К 1,0 мл испытуемого образца прибавляют 5 мл воды, 2 капли раствора калия  хромата и титруют 0,1М раствором  серебра нитрата до оранжево-желтого  окрашивания осадка. 1 мл 0,1М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг натрия хлорида.

    3  Отсутствие механических включений.

    Контроль  растворов на отсутствие механических загрязнений осуществляется невооруженным  глазом в затемненном помещении  на белом и черном фонах, освещенных электрической лампочкой 60 ватт. Расстояние от глаз контролера до ампул 25 см. Контролер берет ампулу в руку, вносит в зону просмотра в положении вверх донышками и просматривает на белом и черном фонах. Затем ампулы плавным движением переворачивают в положение вниз донышками и также просматривают на белом и черном фонах.

    4  Стерильность.

    Из  простерилизованных ампул часть отбирается на бактериологический анализ в бактериологическую лабораторию. Там производиться вскрытие ампул в строго асептических условиях и посев раствора на питательные среды. Если хотя бы из одной ампулы раствор дал рост, вся серия считается нестерильной.

    5  Пирогенность.

    Испытание на пирогенность проводится в бактериологической лаборатории биологическим методом. Метод основан на измерении температуры тела кроликов после введения раствора испытуемого вещества.

    Испытуемый  изотонический раствор натрия хлорида  подогревают до 37°С и вводят в ушную вену кролика в объеме 10 мл в течение 2 минут. Перед введением дважды через каждые 30 минут измеряют температуру тела кроликов, результаты должны отличаться не более чем на 0,2°С. Результат последнего измерения принимают за исходную температуру. После введения испытуемого раствора температуру измеряют трижды через 1 час. Раствор лекарственного вещества считают не пирогенным, если сумма повышений температуры меньше или равна 1,4°С. Если эта сумма превышает 2,2°С, то раствор считают пирогенным.

    6  Бактериальные эндотоксины.

    Испытание на бактериальные эндотоксины проводят для определения наличия эндотоксинов, источником которых являются грамотрицательные  бактерии, с использованием лизата амебоцитов мечехвоста Limulus polyphemus.

    Существует  три принципа проведения данного  испытания: принцип гель-тромба, основанный на образовании геля; турбидиметрический принцип, основанный на помутнении в результате расщепления эндогенного субстрата; хромогенный принцип, основанный на появлении окраски после расщепления синтетического пептидно-хромогенного комплекса.

    Испытание выполняют в условиях, не допускающих  загрязнения посторонними эндотоксинами. Всю стеклянную посуду и другую термоустойчивую  аппаратуру депирогенизируют в сухожаровом шкафу с использованием процесса с подтвержденной эффективностью. Общеприняты минимальные значения времени и температуры обработки, составляющие 30 минут и 250°С, соответственно. При использовании пластиковой аппаратуры, например, микротитрационных планшетов и наконечников для автоматических пипеток, следует продемонстрировать отсутствие на ней поддающихся определению эндотоксинов и мешающих факторов.

    Исходный  стандартный раствор эндотоксина  готовят и хранят, следуя спецификациям, приведенным на листке-вкладыше и  этикетке.

    Приготовление испытуемых растворов. Испытуемые растворы готовят путем растворения или  разбавления активных субстанций или  медицинской продукции с использованием воды для испытания на бактериальные  эндотоксины ИБЭ.

    При необходимости, доводят значение рН испытуемого раствора (или его разведения) так, чтобы рН его смеси с лизатом находилось в интервале, предписанном производителем лизата.

    Определяют  максимально допустимое разведение (МДР) - максимальное разведение образца, при котором может быть определено предельное содержание эндотоксина.

    Предел  эндотоксина для активных субстанций, предназначенных для парентерального  введения, указывается в частных  статьях и выражается в таких  единицах, как МЕ/мл, МЕ/мг, МЕ/(единица  биологической активности) и т.д. 

    2.3. Методы расчета  изотонической концентрации (с  использованием изотонического  эквивалента лекарственных  веществ по натрия хлориду, по закону Вант-Гоффа и Рауля). 

    Методы  расчета изотонической  концентрации с использованием изотонического эквивалента  лекарственных веществ  по натрия хлориду. 

    Преимущества метода (является фармакопейным):

1. универсальность;
2. точность;
3. наиболее часто применим в аптечной практике.

 

    Изотонический эквивалент по натрия хлориду (Э) – количество натрия хлорида, которое создает в одинаковых условиях осмотическое давление, равное осмотическому давлению, созданному 1,0 лекарственного вещества. 

 
 

Методы  расчета изотонической  концентрации по закону Вант-Гоффа. 

По Вант-Гоффу осмотическое давление раствора численно равно тому газовому давлению, которое имело бы растворенное вещество, будучи переведенным в газообразное состояние в том же объеме и при той же температуре. Поскольку объем (разбавление) обратно пропорционален концентрации, то закон Вант-Гоффа можно записать в виде  

Так как объем  одного моля газообразного вещества при нормальных условиях равен 22,4 литра, то осмотическое давление раствора, содержащего 1 моль вещества, равно 22,4 атм. 

    1 г/моль  – при 0º Сили 273° К и 1 атм занимает объем 22,4 л

    Количество воды для растворения 1 г/моля вещества:

                                      22,4 : 7,4 = 3,03 л

    Поправка на температуру тела человека: 273° К + 37° К = 310° К

        273° К – 3,03 л

        310° К – X л                X = 3,44 л  

        Для приготовления 1 литра раствора:

                         1 г/моль – 3,44 л 

                        Х г/моль – 1 л               X = 0,29 г/моль  

                                    m = 0,29 М  

               m – масса вещества, г;

             0,29 – фактор изотоничности неэлектролита;

               М – молекулярная масса вещества.  
 

    Методы  расчета изотонической  концентрации по закону Рауля 

    Закон Рауля: «Давление пара над раствором пропорционально молярной доле растворенного вещества» 

    Следствие из закона Рауля:

1. Понижение температуры замерзания (депрессия) пропорционально понижению давления пара и пропорционально концентрации растворённого вещества в растворе;
2. Изотонические растворы различных веществ замерзают при одной и той же температуре, т. е. имеют одинаковую температурную депрессию 0,52°С (депрессия сыворотки крови).

 

    Депрессия (понижение) температуры замерзания 1 %  раствора лекарственного вещества (Δt) показывает,  на сколько градусов понижается температура замерзания 1%  раствора лекарственного вещества по сравнению с температурой замерзания растворителя. 

    Если  приготовленный раствор какого-либо вещества будет иметь депрессию, равную 0,52°С, он будет изотоничен сыворотке крови.