Другим методом выявления антител
против ВИЧ является реакция непрямой
иммунофлюоресценции. Для постановки
этой реакции используют антиген, который
получают из перевиваемых линий лимфоцитов,
зараженных вирусами иммунодефицита.
Из них готовят препараты фиксированных
клеток, которые можно хранить в течение
2 месяцев при температуре -20 ° С. В случае
необходимости стекла с нанесенным антигеном
обрабатывают разбавленными исследуемыми
сыворотками (1:10,1:100,1:1000 т.д.), а затем люминесцентной
антисывороткой против иммуноглобулинов
человека. Препараты дополнительно контрастируют
синькой Эванса и изучают в люминесцентном
микроскопе.
Вирусологическая диагностика
Материалом для исследования
может быть кровь, спинномозговая
жидкость, грудное молоко, сперма, биоптаты
при аутопсии подобное. Для выявления
вируса используют электронную микроскопию,
заражения культур Т-лимфоцитов (CD4-клетки).
Для идентификации вирусов возможно использование
высокочувствительных тест-систем ИФА,
реакции непрямой иммунофлуоресценции,
характерной цитопатического действия
подобное. Важным для диагностики СПИДа
является определение провируса в лимфоцитах,
или вирусных нуклеиновых кислот в патологическом
материале. С этой целью широко используются
методы молекулярной гибридизации. Использование
этого метода приобретает важное значение
особенно из-за того, что серонегативный
период при СПИДе может длиться несколько
месяцев. Высокая чувствительность предлагаемого
метода позволяет выявить даже единичные
вирусные частицы в крови (0,1-1,0 нг нуклеиновых
кислот). Принцип его заключается в том,
что в условиях in vitro вызывается процесс
гибридизации между вирусной нуклеиновой
кислотой (ДНК, РНК) и специальным зондом,
который меченый радиоактивным фосфором
32Р. Образующийся комплекс достаточно
легко идентифицировать с помощью авторадиографии.
Однако использование 32Р-зондов в определенной
степени усложняет этот метод, поскольку
они имеют короткий (2 недели) период полураспада,
требуют соблюдения строгих правил техники
безопасности при работе с радиоактивными
изотопами подобное.
Лечение и
профилактика. Разработано 3 направления в лечении:
1. этиотропная терапия. Используют следующие
препараты: 1. Азидотимизин
(АЗТ), инактивирующий обратную транскриптазу
вируса. Этот препарат токсичный и
дорогой, но он продлевает жизнь больному.
2. Альфа - интерферон вместе с АЗТ
удлиняет латентный период, подавляя
репликацию.
2. Иммуностимуляция. Вводят интерлейкин
-2, интерфероны и иммуноглобулины.
3. Лечение опухолей, вторичных инфекций
и инвазий (применяют ацикловир
и др).
Профилактика. Только
неспецифическая. Кровь для
переливания должна обязательно тестироваться
на содержание ВИЧ. Попытки создать
вакцины, в том числе генноинженерия,
производящиеся во всем мире пока успеха
не
имеют.
Волгоградский
государственный медицинский университет.
Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии.
Реферат на тему:
ВИЧ инфекции.
Подготовил: студент 2го курса, 15ой группы, лечебного
факультета, Нигай Сергей.