Санитарная микробиология

Примечание:

              1 Трехкратно исследуют по 100 мл отобранной пробы воды.

              2 Превышение норматива не допускается в 95 % проб, отбираемых в точках водоразбора наружной и внутренней водопроводной сети в течение 12 мес., при количестве исследуемых проб не менее 100 за год.

3 Определяют только в системах водоснабжения из поверхностных источников перед подачей воды в распределительную сеть.

4 Определение проводят при оценке эффективности технологии обработки воды.

Санитарно-микробиологическое исследование воздуха

              Воздух является неблагоприятной средой обитания для микроорганизмов, так как в нем  отсутствуют питательные вещества, необходимые для поддержания их жизни и размножения. Одним из важных условий для выживания в воздухе является способность микроорганизмов противостоять высушиванию, действию ультрафиолетовых и радиоактивных лучей, колебаниям температуры и др. неблагоприятным факторам. Микрофлора атмосферного воздуха формируется в основном за счет почвенных микроорганизмов, в меньшей степени они попадают в воздух с поверхности воды или растений. Поэтому наибольшее количество микроорганизмов содержится вблизи земной поверхности.

              В атмосферном воздухе обнаруживаются сапрофитные микроорганизмы, представленные кокками (микрококки, сарцины и др.)  споровыми бактериями (Bacillus subtilis, B. cereus, B. mesentericus и др.), актиномицетами и грибами (Penicillium, Aspergillus, Mucor и др.). Они находятся в воздухе во взвешенном (аэрозольном) состоянии. Механизмами самоочищения воздуха являются действие  солнечных лучей, оседание бактериальных аэрозолей под действием гравитации, постоянное перемешивание и повышенная влажность (дождь, снег). Максимальное количество микроорганизмов в воздухе обнаруживают летом (июнь-август), минимальное – зимой (декабрь-январь).

              Атмосферный воздух значительно отличается по количеству микроорганизмов и их видовому составу от воздуха закрытых помещений.  Бактериальная обсемененность воздуха закрытых помещений всегда выше, чем атмосферного воздуха. В составе воздуха закрытых помещений   помимо сапрофитной микрофлоры  находятся те микроорганизмы, которые выделяет человек через дыхательные пути (при разговоре, кашле, чихании), с поверхности кожи, с пылью загрязненного постельного белья и др. источников (домашние животные, декоративные птицы). Здоровый человек при чихании выделяет в воздух

10 000-20 000 микробных тел, а больной или бактерионоситель – значительно больше.        Микроорганизмы из ротоглотки человека  находятся  в воздухе в составе капелек слизи, которые могут часами удерживаться во взвешенном состоянии, образуя стойкие аэрозоли. Присутствие в воздухе патогенных микроорганизмов свидетельствует о санитарном неблагополучии  объектов обследования, т.к. воздушно-капельным и воздушно-пылевым путем могут передаваться многие болезни (грипп, корь, дифтерия, коклюш, туберкулез и т.п.). 

              Для оценки санитарного состояния воздуха закрытых помещений  определяют общее микробное число и количество санитарно-показательных микроорганизмов, к которым относятся  гемолитические стафилококки, α- и β- гемолитические стрептококки.  При необходимости, например, в хирургических стационарах, родильных домах дополнительно определяют наличие и количество синегнойной палочки и др. грамотрицательных условно-патогенных бактерий – возбудителей внутрибольничных инфекций.

              Бактериальную обсемененность и количество санитарно-показательных микроорганизмов определяют по их количественному содержанию в 1 м3 (1000 литров) воздуха.

              В настоящее время существует много методов и устройств для отбора проб воздуха и  их исследования.

Наиболее простыми и доступными для проведения санитарно-бактериологического исследования воздуха являются седиментационный и аспирационный методы.

              Седиментационный метод Коха (Koch, 1881 г) основан на спонтанном оседании микроорганизмов под действием силы тяжести на поверхности питательной среды открытой чашки Петри.

              Для определения общего микробного числа две чашки Петри со стерильным МПА оставляют открытыми в течение 10-30 мин. Затем их закрывают, надписывают и инкубируют в термостате при 37ºС в течение 24 час. Затем посевы выдерживают 24 час  при комнатной температуре для выявления плесневых грибов. Таким образом, через 48 ч подсчитывают суммарное количество колоний, выросших на чашках.   Исходят из того, что за 5 мин на поверхность 100см2   плотной среды оседают  бактерии из 10 литров воздуха (Омелянский В.Л.).

              Для выявления санитарно-показательных микроорганизмов используют специальные питательные среды: для стафилококков – желточно-солевой агар (экспозиция 15 мин), для гемолитических стафилококков и стрептококков – кровяной агар (экспозиция 10-15 мин), для грибов – среду Сабуро (посевы выдерживают 3-5- суток при 20-22 ºС).

              Аспирационный метод основан на ударном действии воздушной струи о поверхность питательной среды,  на которую оседают микроорганизмы. Его проводят с использованием аппарата Кротова или его современных модификаций (ПУ-1Б и др.), которые состоят из узла для отбора проб воздуха, микроманометра и электромотора (рис. 5,6). В аппарате Кротова узел для отбора проб вмонтирован в металлический корпус и имеет центробежный вентилятор,  площадку с зажимами для установки чашки Петри, крышку из плексиглаза, в которой вырезана клиновидная щель для всасывания воздуха. На площадку устанавливают открытую чашку Петри с питательной средой, закрывают крышкой аппарата и включают мотор. Вращением центробежного вентилятора воздух засасывается через клиновидную щель и с силой ударяется о поверхность питательной среды, на которой оседают микроорганизмы, равномерно распределяясь по ней.  Скорость вращения чашки Петри  регулируется, что позволяет пропускать разный объем воздуха в минуту, который   фиксируется микроманометром.  По истечении заданного времени экспозиции  выключают мотор, чашку Петри с посевом воздуха снимают, закрывают и ставят в термостат.

Считают, что для определения общего микробного числа необходимо использовать МПА, скорость   пропускания воздуха через аппарат   25л/мин с экспозицией 4 мин, что гарантирует оседание микроорганизмов из объема не менее 100 л воздуха. Для обнаружения золотистого стафилококка    используют желточно-солевой агар,  гемолитических стафилококков и  стрептококков  - 3-5% кровяной агар, а  время экспозиции увеличивают до 10-15 мин, что обеспечивает посев бактерий из 250-300 л воздуха.

              Посев воздуха  проводят в две чашки Петри с МПА или желточно-солевым агаром и выращивают 48 час (24 час в термостате при 37ºС, затем выдерживают 24 час при комнатной температуре). Чашки Петри с кровяным агаром инкубируют в термостате при 37ºС 24 час. Подсчитывают количество выросших колоний и полученные данные пересчитывают на 1 м3 исследуемого воздуха.

8