Определение чистоты лекарственных средств химическими, физическими и физико-химическими методами анализа

Методика приготовления состоят из нескольких этапов. Схема приготовления: Исходные растворы ® Основной эталон® Эталонные растворы.

Эталонные растворы обозначают: I,  II,  III,  IV.

Приготовление эталонных растворов для определения  степени мутности указано в ГФXII.

Методика  определения степени мутности окрашенных жидкостей: часть испытуемого раствора фильтруют и помещают в компаратор, а рядом ставят пробирку с нефильтрованной жидкостью. За ней должна находиться пробирка с водой, а за пробиркой с фильтрованной жидкостью поочередно помещают эталоны от IV до I. Выбирают тот из них, который имеет одинаковую степень мутности с нефильтрованной жидкостью.

 

Задание 3.

3.1. Приготовить  эталонные растворы для определения степени мутности.

а) Приготовление исходного раствора. Отмеривают в стеклянную посуду с притертой пробкой вместимостью 50 мл, пипеткой Мора по 25 растворов гидразина сульфата и гекасметилентетрамина (приготовлены заранее лаборантами), оформляют этикеткой, ставят дату приготовления. Срок годности 2 месяца.

б) Приготовление основного эталона. 15,0 мл исходного эталона помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, доводят объем жидкости водой до метки и перемешивают. Срок годности 24 ч.

в) Приготовление эталонов сравнения. Отмеренное количество основного эталона, указанное в приведенной ниже таблице, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем жидкости водой до метки и перемешивают.

 Таблица 4

	Эталоны сравнения
	I	II	III	IV
Основной эталон, мл	5,0	10,0	30,0	50,0
Вода, мл	95,0	90,0	70,0	50,0

 

3.2. Освоить методику определения прозрачность и степень мутности растворов лекарственных веществ

Для выполнения лабораторной работы в табл. 5. приведены ЛВ. Растворы приготавливают с соблюдением условий, указанных в соответствующей ФС.  Прозрачность и степень мутности исследуемого раствора и эталона наблюдают в проходящем свете. Для этого пробирки следует помещать в направлении источника света, опустив их ниже последнего, чтобы взгляд попадал на какую-либо темную поверхность.

Таблица 5.

Условия проведения испытаний на  прозрачность и степени мутности растворов  лекарственных веществ

 

Лекарственное вещество	Условия приготовления  раствора	Условия определения и результаты	Прозрачность и степень мутности по ФС	Соответствие требованиям  ФС
Натрия хлорид	16 г растворяют в  160 мл свежепрокипяченной и охлажденной  воды		Прозрачный или не превышает эталон Ι
Анальгин	0,5 г ЛВ  растворяют в 5 мл свежепрокипя-ченной и охлажденной воды		Прозрачный или не превышает эталон Ι
Глюкоза	0,5 г растворяют в 10мл свежепрокипя-ченной воды при нагревании на водяной бане температуре 60°С		Полученный раствор  должен быть прозрачным

Фармакопейные статьи на анализируемые вещества приведены  в Приложении данного пособия.

 

2.4. Определение окраски жидкостей (ГФ XII, часть 1. с. 93) (ОФС 42-0050-07)

Окраску жидкостей определяют визуально, сравнивая с равным количеством эталона в пробирках одинакового стекла и диаметра на матово-белом фоне. Бесцветными считаются жидкости, если их окраска не отличается от воды (в случае растворов - от соответствующего растворителя) или выдерживают сравнение с эталоном В₉, т.е. должны быть окрашены не более интенсивно, чем эталон В₉.которые по цвету не отличаются от воды, а в случае растворов - от растворителя.

Окраску жидкостей  определяют визуально одним из методов, приведенных ниже, путем сравнения с соответствующими эталонами.

Метод 1

Испытания проводят в одинаковых пробирках из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром около 12 мм, используя равные объемы - 2,0 мл испытуемой жидкости и воды, или растворителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окраску в дневном отраженном свете, горизонтально (перпендикулярно оси пробирок) на матово-белом фоне (эталоны 1-3).

Метод 2

Испытания проводят в одинаковых пробирках из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром от 15 до 25 мм, используя равные слои высотой 40 мм испытуемой жидкости и воды, или растворителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окраску в дневном отраженном свете сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне (эталоны 4-9).

Общая схема приготовления эталонных растворов для определения окраски жидкостей: Исходные растворы® стандартные растворы ®Эталонные растворы.

Для приготовления  трех исходных растворов используют окрашенные соли химических веществ: железа(Ш) хлорида (FеС1₃ ^х 6 Н₂О)- желтый раствор,  кобальта(II) хлорида (СоС1₂ ^х 6 Н₂О) - красный раствор, меди(П) сульфата (СuSО₄ ^х 5 Н₂О) - голубой раствор.

Далее готовят стандартные растворы  смешением исходных растворов, их обозначают: В (коричневый), ВY (коричневато-желтый), Y (желтый), GY(зеленовато-желтый) и R (красный).

Эталонные растворы готовят из пяти стандартных растворов  путем разбавления их 1 % раствором хлористоводородной кислоты.

Из коричневого  раствора готовят девять растворов  с В₁ по В₉, , а из остальных по семь растворов, придают соответствующие обозначения.( ВY, Y, GY, R.

Методики  приготовления исходных, стандартных  и эталонных растворов приведены  в ОФС (ГФ XII, часть 1.   с. 93)

Сравнение степени окраски  жидкости с эталонами (В, ВY, Y, GY, R)_1-3 обычно проводят по методу I; в случае использования эталонов В_{4 - 9} (ВY, Y, GY, R)_{4 -7} применяют метод II.

Степень окраски испытуемого  раствора не должна превышать степень  окраски соответствующего эталона. Цвет испытуемого образца должен быть максимально приближен к  цвету соответствующего эталона.

При сравнении окраски  испытуемого раствора с эталонами  указывают, кроме номера эталона, букву  шкалы. Например, окраска раствора не должна превышать эталон В₇.

При необходимости могут  быть использованы другие эталоны, приготовленные путём смешения стандартных растворов разных цветовых шкал с точным указанием их объёмов для достижения нужной окраски, приближенной к окраске испытуемого раствора, если это предусмотрено частной статьёй.

Для оценки окраски жидкостей  возможно использование спектрофотометрического метода, при этом должны быть указаны: длина волны, при которой наблюдается максимум поглощения в видимой область спектра, толщина кюветы и значении оптической плотности с допустимыми отклонениями, если это предусмотрено частной фармакопейной статьёй.

 

Задание 4. Определить окраску растворов лекарственных веществ

Для выполнения лабораторной работы в таблице приведены ЛВ. Наблюдение проводят на матово-белом фоне сверху через весь слой жидкости. Для определения окраски используют растворы резорцина, парацетамола и др. веществ 

Таблица.

Условия проведения испытаний на цветность  растворов лекарственных веществ

 

Лекарственные вещества	Условия приготовления  раствора	Цветность раствора по ФС	Соответствие требованиям  ФС
Изониазид	2,5 г ЛВ растворяют в 50 мл воды	Должен выдерживать  сравнение с эталоном ВY7.
Анальгин	6,25 г ЛВ растворяют в мерную колбу вместимостью 25 мл  свежепрокипяченной и охлажденной воды	Окраска  раствора не должна быть интенсивнее окраски эталона GY6.
Левомицетин	0,5 г субстанции растворяют в 10 мл спирта 96 %.	должен выдерживать  сравнение с эталоном Y5.

 Фармакопейные статьи на анализируемые вещества приведены в Приложении данного пособия.

Вопросы для  самоконтроля

1. Почему в ГФ XI введена общая фармакопейная статья «Определение степени белизны порошкообразных лекарственных средств?» Каково её назначение?
2. Какие физические и физико–химические константы могут измениться при появлении примесей в лекарственных средствах?
3. Какие общие физические и физико-химические методы установления доброкачественности лекарственных веществ включены в ГФ XII?
4. Что подразумевается под термином «растворимость» в ГФ XII?
5. Какие условные термины приняты ГФ XII для обозначения растворимости и для каких соотношений лекарственного вещества и растворителя?
6. В чем особенности определения растворимости медленно растворимых лекарственных веществ в соответствии с требованиями ГФ XII?
7. Как доказать, что 3% спиртовые и водные растворы кислоты борной прозрачны?
8. Какие жидкости по ГФ XII считаются прозрачными и какие бесцветными?
9. Сколько эталонных растворов существует для определения степени мутности жидкостей по ГФ XII? Какова методика приготовления и продолжительность пригодности этих эталонов?
10. Как готовят по ГФ XII исходный и основной эталоны для определения степени мутности?
11. Сколько эталонов окраски приведено в ГФ XII. Как они готовятся?
12. В течение какого срока можно применять исходные, стандартные и эталонные растворы, приготовленные по ГФ XII для определения окраски жидкостей?
13. Как подтвердить соответствие лекарственного вещества требованиям ГФ XII по растворимости, если в ФС указано, что он легко растворим в воде и очень мало растворим в хлороформе?
14. Лекарственными веществами являются кислота салициловая, кислота ацетилсалициловая и натрия салицилат. Как различается их растворимость?
15. Кислота бензойная мало растворима в воде и легко растворима в спирте этиловом. Как провести данное испытание?
16. Какими эталонами определяется прозрачность, а какими степень мутности лекарственных веществ?
17. Для определения окраски жидкостей были приготовлены исходные растворы хлорида кобальта, сульфата меди и хлорида железа (III). В течение какого срока из них можно готовить стандартные растворы?

Литература.

 

Тема 3.

 

Общие принципы приготовления эталонных  растворов для определения чистоты ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ химическими методами.

 Экспериментальная часть.  Приготовление эталонных растворов.

• Практические навыки. Овладеть практическими навыками приготовления эталонных растворов для определения чистоты лекарственных средств и научиться проводить сравнение растворов исследуемых веществ с ними.
• Уметь: работать с ГФ,  ФС,  ВФС.

Теоретическое обоснование. Определение примесей в лекарственных веществах

Все лекарственные  вещества независимо от способов получения испытывают на чистоту, устанавливая содержание примесей.

Примеси, встречающиеся  в лекарственных веществах, условно можно разделить на общие и специфические.

Примеси, которые  зависят от природы вещества и  способа его получения, называют специфическими. Это могут быть примеси исходных веществ или побочных продуктов синтеза, а также продуктов разложения. Специфические примеси определяют по методикам, указанным в частных фармакопейных статьях.

Общие примеси, как правило, зависят от технологии и могут содержать примеси  солей тяжелых металлов, сульфатов, хлоридов, кислот и др. Эти примеси могут попасть в лекарственные вещества из технологического оборудования, растворителей и т.д.

Определение общих примесей проводят по статье ГФ XI и XII издания.

При обнаружении  примесей необходимо руководствоваться  требованиями ГФ, строго выполняя указания по количественному соотношению реактивов, последовательности их прибавления, продолжительности проведения испытания и условиям установления результатов реакции. С этой целью в ГФ XI и XII даны конкретные рекомендации по подготовке и проведению испытаний.

Общие замечания (Государственная фармакопея РФ XII издания, С 118.)

1. Вода и все реактивы должны быть свободны от ионов, на содержание которых проводят испытания.
2. Пробирки, в которых проводят наблюдения, должны быть бесцветными и одинакового диаметра (около 1,5 см, если не указано иначе).
3. Если не указано иначе, навески для приготовления эталонных растворов отвешивают с точностью до 0,001 г.
4. Наблюдения мути и опалесценции растворов проводят в проходящем светена темном фоне, а окраски - по оси пробирок при дневном отраженном свете наматово-белом фоне.
5. Прибавление реактивов к испытуемому и эталонному растворам должно проводиться одновременно и в одинаковых количествах.
6. В случае, когда в соответствующей фармакопейной статье указано, что в данной концентрации раствора не должно обнаруживаться той или иной примеси, поступают следующим образом. К 10 мл испытуемого раствора прибавляют применяемые для каждой реакции реактивы, указанные в методике, кроме основного реактива, открывающего данную примесь. Затем раствор делят на две равные части: к одной из них прибавляют основной реактив и оба раствора сравнивают между собой. Между ними не должно быть заметной разницы.