Основные направления современной гистологии, их методы исследования

      Большим достоинством метода радиоавтографии является возможность вести исследования без разрушения тканевых структур. Регистрация включения меченых предшественников производится при помощи специальных фотоэмульсий. Срезы ткани покрывают «пленкой» такой эмульсии и экспонируют в течение более или менее продолжительного времени (обычно 7-14 -дней для световой микроскопии и более длительное время для элек­тронной микроскопии). Электроны, испускаемые предшественником, включенным в макромолекулы, возбуждают зерна AgBr эмульсии над структурами, содержащими эти макромолекулы. При специальной обработке автографов над срезом остаются лишь возбужденные электронами отдельные черные зерна восстановленного серебра (в случае трития — с малой длиной пробега электронов) или цепочек зерен — треков (в случае электронов углерода [С] — с большой энергией излучения). В результате центрифугирования получают интересующие фракции, которые затем изучают различными методами [3].  
 
 
 
 
 
 
 
 
 

ГЛАВА 4. МЕТОДЫ КАЧЕСТВЕННОГО И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СТРУКТУР 

4.1 ЦИТОСПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ

      Метод изучения химического состава клетки, основанный на избирательном поглощении теми или иными веществами лучей с определенной длиной волны. По интенсивности поглощения света, которая зависит от концентрации вещества, производится количественное определения его содержания в клетке.  

4.2. МЕТОД ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОГО ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ

      Изучение отдельных органелл или даже их фрагментов, выделенных из клетки.

      Техника дифференциального центрифугирования в настоящее время позволяет выделять отдельные клеточные органоиды и даже их отдельные компоненты типа наружной и внутренней мембран митохондрий, гладкой и шероховатой ЭПС и т. п. Для этого кусочек исследуемого органа растирают, заливают физиологическим раствором, а затем разгоняют в центрифуге (рис.8) при различных оборотах (от 2 до 150 тыс. в 1 мин). Однако для анализа гетерогенных по составу тканевых систем биохимические методы оказываются не всегда применимыми. 

 Рис.8 Центрифуга СМ-50 для центрифугирования микропробирок

4.3 ЦИТОСПЕКТРОФЛЮОРИМЕТРИЯ

      Метод количественного изучения  внутриклеточных веществ по спектрам  их флюоресценции или по интенсивности флюоресценции на одной заранее

выбранной волне. Современные микроскопы-цитофлюориметры  позволяют обнаружить в различных  структурах малые количества вещества

(до  10^-14-10^-16 г) и обеспечивают возможность оценить локализацию исследуемых веществ в микроструктурах. 

4.4 ИНТЕРФЕРОМЕТРИЯ

      Метод позволяющий оценить сухую массу и концентрацию плотных веществ в живой и фиксированной клетке. С помощью этого метода, например, можно установить суммарное содержание белков в живых и фиксированных клетках. 

4.5 АВТОМАТИЗИРОВАННЫЕ  СИСТЕМЫ ОБРАБОТКИ ИЗОБРАЖЕНИЙ

      Данный метод получил большое распространение. Он позволяет существенно повысить точность и эффективность микроскопических исследований, получить качественно новую информацию об исследуемых объектах, недоступную при визуальном микроскопическом анализе [4]. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

      Развитие гистологии как науки и её дальнейший прогресс тесно связаны с совершенствованием методов исследования. Современная гистология располагает большим арсеналом средств для изучения биологических структур на всех уровнях их организации - клеточном, тканевом, органном. Основными объектами исследования в гистологии являются гистологические препараты и их изображения, главным методом исследования – микроскопирование.

      В связи с созданием и совершенствованием  электронного микроскопа большое  значение приобрел метод ультрамикроскопического  исследования структур, который  позволил изучать клетки и  ткани на субклеточном и молекулярном  уровне.

      Прогресс современной гистологии  в большей степени определяется  тем, что она основывается на  достижениях физики, химии, математики, кибернетики. Внедрение новейших  методов исследования обусловило  бурное развитие биологических  наук, в том числе гистологии. Данные гистологии все шире используются в клинических дисциплинах. В клинике наряду с клиническими методами исследования заслуженное признание получили методы морфологического анализа - изучение клеток крови, красного костного мозга, пунктатов и биопсий печени, селезенки и других органов.

      Таким образом, гистология занимает  важное место в системе медицинского образования и позволяет заложить основы научного структурно-функционального подхода в анализе жизнедеятельности организма человека в норме и патологии. 
 
 
 
 
 

СПИСОК  ЛИТЕРАТУРЫ

1. Елисеев В.Г., Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А.. Гистология. – М.: «Медицина», 1983 - 592 с.

2.Каюмов Ф.А., Ахмадеев А.В., Шарафутдинова Л.А..Гистология. – У.: РИЦ БашГУ, 2006

3. Афанасьев Ю.И., Юрина Н.А., Алешин Б.В.. Гистология, цитология и эмбриология. 5-е изд., перераб. и доп. - М., 1999 – 662 с.

4. Хэм А., Кормак Д.. Гистология. – М.: «Мир», 1982 в 5 томах

5. www.histomix.ru/product_4.html