Интерферон"виферон,реаферон",интерлейкин

Противоопухолевый эффект интерферонов связан с их способностью замедлять или подавлять рост культуры клеток и активировать противоопухолевые механизмы иммунной системы. Это свойство интерферонов было обнаружено давно и широко используется в терапевтических целях. Все противоопухолевые эффекты интерферонов делятся на прямые и непрямые. Прямы связаны со способность оказывать непосредственное действие на опухолевый клетки, их рост и дифференцировку. Непрямые связаны с усилением способности иммунокомпетентных клеток обнаруживать и уничтожать атипичных клетки организма.

Прямые противоопухолевые  эффекты интерферона:

• Подавление синтеза РНК.
• Подавление синтеза протеинов.
• Стимуляция недифференцированных клеток к созреванию.
• Увеличение экспрессии мембранных антигенов опухолевых клеток и рецепторов к гормонам.
• Нарушение процессов сосудообразования.
• Нейтрализация онковирусов.
• Подавление действие опухолевых ростовых факторов.

Непрямые противоопухолевые  эффекты интерферона:

• Стимуляция активности клеток иммунной системы (макрофагов, NK-клеток, Т-цитотоксических лимфоцитов).
• Усиление экспрессии на клетках молекул гистосовместимости I класса.

Антипролиферативный эффект интерферонов заключается в способности интерферонов проявлять свойства цитостатиков – подавлять роста клеток за счет подавления синтеза РНК и протеинов, а так же ингибирования ростовых факторов стимулирующих пролиферацию клеток.

Роль интерферонов в иммунной системе

Интерфероны - это особая группа белков, которые продуцируются клетками иммунной системы у большинства животных и человека. Интерфероны представляют собой вид оружия при помощи которого мы может противостоять болезнетворным бактериям, паразитам и даже раковым клеткам.

Существует  три основных класса интерферон альфа (α), интерферон бета (β), интерферон гамма (γ) и интерферон омега (ω). Все они не только обладают антивирусным и противоопухолевым действием, но что важнее, обладают свойством активировать – понуждать к действию такие клетки иммунной системы как макрофаги.

Интерферон -α выделяется белыми кровяными клетками (лейкоцитами Т и В). Интерферон -β выделяется фибробластами, интерферон -γ продуцируется T-клетками и естественными киллерами.

 
Все виды интерферона оказывают  очень большое влияние на течение  РНК –вирусных инфекций.  
В большинстве случаев продукция интерферона провоцируется проникновением в организм бактерий, вирусов или продуктов их жизнедеятельности. Интерферон не только самостоятельно борется со зловредными микроорганизмами и злокачественными опухолями, но и активирует другие факторы защиты – макрофаги и естественные киллеры. 
Гамма - интерферон регулирует иммунный ответ, и выраженность воспалительных реакций Он продуцируется активированными Т-клетками и естественными киллерами. Интерферон гамма обладает самостоятельным антивирусным и противоопухолевым эффектом, но он очень слаб. Тем не менее гамма  интерферон существенно усиливает активность альфа и бета интерферона.  
Интерферон - омега выделяется лейкоцитами в месте вирусных инфекций и опухолей. При заражении клеток нашего организма вирусом, вирус начинает размножаться, и одновременно клетка-хозяин начинает продуцировать интерферон. Интерферон выходит из клетки, вступает в контакт с соседними клетками и делает их невосприимчивыми к вирусу. Он запускает цепь событий, приводящих к подавлению синтеза вирусных белков и (в некоторых случаях) сборки и выхода вирусных частиц. Таким образом, в клетке происходят изменения, которые препятствуют размножению вируса. Интерферон вырабатывается также в ответ на внедрение в клетку любых генетически чуждых агентов (антигенов), чужеродных белков и нуклеиновых кислот.  
Учитывая вышеизложенное, понятно, почему многие мощные Зарубежные и Российские фирмы работают над созданием лекарственные форм препаратов интерферона 
В настоящее время препараты интерферона делятся на (РАФАЛЬСКИЙ В.В.):  
• Инъекционные растворы  
• Лиофилизированные формы  
• Глазные капли и пленки  
• Ректальные и вагинальные лекарственные формы - суппозитории (отечественный препарат виферон), микроклизмы)  
• Мази, дерматологические гели  
• Аэрозоли  
• Пероральные растворы  
• Таблетированные пероральные формы (энтальферон)  
• Имплантаты  
• Липосомы

Система интерферона (ИФН) — важнейший фактор неспецифической резистентности организма человека. Следует отметить, что открытие интерферона А. Айзексом и Ж. Линденманном (1957) было плодом блестящей случайности, по своей значимости сравнимой с открытием пенициллинов Флемингом: изучая интерференцию вирусов, авторы обратили внимание на то, что некоторые клетки становились резистентными к повторному заражению вирусами.

В настоящее время интерферон относят к классу индуцируемых белков клеток позвоночных. Важнейшие их функции: антивирусная, противоопухолевая, иммуномодулирующая и радиопротективная. Различают три ИФН: а-ИФН синтезируют лейкоциты периферической крови (ранее был известен как лейкоцитарный ИФН); бета-ИФН синтезируют фибробласты (ранее был известен как фибробластный ИФН); у-ИФН — продукт стимулированных Т-лимфоцитов, NK-клеток и (возможно) макрофагов (ранее был известен как иммунный ИФН).

По способу образования  различают интерферон типа I (образуется в ответ на обработку клеток вирусами, молекулами двухцепочечной РНК, полинуклеотидами и радом низкомолекулярных природных и синтетических соединений) и ИФН типа II (продуцируется лимфоцитами и макрофагами, активированными различными индукторами; действует как цитокин). ИФН видоспецифичны. Каждый биологический вид, способный к их образованию, продуцирует свои уникальные продукты, похожие по структуре и свойствам, но не способные проявлять перекрёстный антивирусный эффект (то есть действовать в условиях организма другого вида).

Механизм антивирусного  действия. Интерферон индуцируют «антивирусное состояние» клетки (резистентность к проникновению или блокада репродукции вирусов). Блокада репродуктивных процессов при проникновении вируса в клетку обусловлена угнетением трансляции вирусной мРНК. При этом противовирусный эффект ИФН не направлен против конкретных вирусов; то есть ИФН не обладают вирусоспецифичностью. Это объясняет их универсально широкий спектр антивирусной активности.

Интерферон взаимодействует с интактными, ещё неинфицированными клетками, препятствуя реализации репродуктивного цикла вирусов за счёт активации клеточных ферментов (протеинкиназ).

Интерферон I. Основной биологический эффект — подавление синтеза вирусных белков; способны воздействовать на другие этапы репродукции вирусных частиц, включая отпочковывание дочерних популяций. «Антивирусное состояние» клетки развивается в течение нескольких часов после введения интерферонов или индукции их синтеза. При этом интерфероны не влияют на ранние этапы репликативного цикла (адсорбцию, пенетрацию и «раздевание» вирусов) — противовирусное действие проявляется даже при заражении клеток инфекционными РНК. ИФН не проникают в клетки, а взаимодействуют со специфическими мембранными рецепторами (ганглиозиды или аналогичные структуры, содержащие олигосахара).

По связыванию интерферона с рецептором и реализации его эффектов механизм активности напоминает действие некоторых гликопептидных гормонов. ИФН активирует гены, некоторые из которых кодируют образование продуктов с прямым антивирусным действием — протеинкиназы и олигоаденилат синте-тазы.

Интерферон II (бета-интерферон) также способны проявлять антивирусный эффект. Он связан с несколькими механизмами. Во-первых, активация интерфероном N0-синтетазы приводит к повышению внутриклеточного содержания оксида азота, ингибирующего размножение вирусов. Во-вторых, ИФН активирует эффекторные функции NK-клеток, Т-лимфоцитов, моноцитов, тканевых макрофагов и гранулоцитов, проявляющих антителозависимую и антите-лонезависимую цитотоксичность. Кроме того, ИФН блокирует депротеи-низацию («раздевание») вирусов, высвобождение зрелых вирусных частиц из клетки, а также нарушает метилирование вирусной РНК.

В смешанных культурах интерферон-чувствительных и интерферон-резистентных клеток «антивирусное состояние» чувствительных клеток распространяется и на популяции резистентных клеток.

Индукторы интерферона

Индукторы интерферона — это вещества природного или синтетического происхождения, стимулирующие в организме человека продукцию собственного интерферона, который способствует формированию защитного барьера, препятствующего инфицированию организма вирусами и бактериями, а также регулирует состояние иммунной системы и ингибирует рост злокачественных клеток. Перспективными интерфероногенами являются низкомолекулярные производные акридонуксусной кислоты (карбоксиметилакридон — CMA), а также различные производные флуоренонов. Примером известнейших лекарственных препаратов-индукторов интерферона являются циклоферон и тилорон.

Известно, что широкое  применение антибиотиков, химиотерапевтических и противовирусных препаратов в  лечении инфекционно-воспалительных заболеваний часто приводит ко многим побочным эффектам (аллергические реакции, дисбактериоз, гепатотоксичность, иммунодепрессивные состояния) и может сопровождаться появлением новых устойчивых штаммов  микроорганизмов.  
 
Часто развивающийся после курса антибиотикотерапии синдром «иммуно-логической недостаточности» может повышать вероятность последующих заражений инфекционными агентами другой природы, поскольку восстановление иммунного статуса протекает недостаточно быстро.  
 
В связи с этим медицинская практика решает задачу одновременного повышения эффективности этиотропной терапии и снижения побочных эффектов, появляющихся в ходе ее применения, увеличения функциональной активности собственной иммунной системы и ускорения восстановления ее нарушенных звеньев, исключения аллергизации организма и развития иммунодефицита.  
 
В настоящее время в терапии многих инфекционных заболеваний все шире и чаще применяются препараты интерферонов.  
 
Задолго до открытия интерферона вирусологи столкнулись с малопонятным феноменом интерференции (взаимного подавления) вирусов. В случае заражения животных вирусом одного типа они становились невосприимчивыми к вирусам другого типа.  
 
В 1957 году английский ученый Алик Айзеке и швейцарский Джин Линден-ман впервые получили белок, определяющий феномен интерференции, и назвали его «интерферон». Это открытие послужило толчком к развитию самостоятельного направления в медицинской науке на стыке вирусологии и иммунологии — интерферонологии. Об интенсивности исследований в этой области свидетельствует тот факт, что в день выходит около 1200 научных и медицинских публикаций, связанных с проблемой интерферона.  
 
Было установлено, что интерфероны (ИФН) — это белки, которые могут вырабатываться практически всеми клетками организма в любой момент в ответ на внедрение чужеродной информации вне зависимости от ее природы (вирусы, бактерии, грибы, онкогены).  
 
Главный биологический смысл ИФН — участие в процессах распознавания и удаления чужеродной информации. Уникальность свойств интерферона состоит в сочетании антивирусной, иммуномодулирующей и антипролифератив-ной активности. Исходя из этого было сформулировано понятие системы интерферона.  
 
Система интерферона включает механизмы индукции и продукции различных белков, отличных по аминокислотной последовательности, молекулярной массе и осуществляемым ими в организме функциям в нескольких наиболее изученных направлениях: формировании противовирусной и антибактериальной защиты, поддержании устойчивости клеток к внедрению микроорганизмов, воздействии на систему клеточного иммунитета. Даже простое перечисление эффектов интерферона свидетельствует о том, что по весомости эта система сравнима с системой иммунитета, а по универсальности — даже превосходит ее.  
 
В начале в медицинскую практику нашей страны были внедрены природные интерфероны. Эта работа проводилась под руководством академика Соловьева В.Д. Первое производство лейкоцитарного интерферона было организовано на базе НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМЫ, его возглавил академик РАЕН Кузнецов В.П. В середине семидесятых годов в целях укрупнения масштабов производства и исключения использования в качестве сырья донорской крови были разработаны способы получения ИФНов генно-инженерным путем. В результате совместной работы институтов АН И АМН СССР под руководством Ю.А. Овчинникова во ВНИИ генетики и селекции промышленных микроорганизмов Главмикробиопрома СССР был создан штамм-продуцент рекомбинан-тного интерферона а2. В восьмидесятых годах в системе Главмикробиопрома СССР было организовано производство а.2 интерферона.  
 
Рекомбинантные интерфероны по составу и происхождению делятся на три основных типа: а-ИФН, р-ЙФН и у-ИФН.  
 
Схематически действие ИФН можно представить следующим образом: ИФНы индуцируют синтез протеинкиназы, которая фосфорилирует один из инициирующих факторов трансляции. В результате не образуется инициирующий комплекс для начала процесса трансляции. Избирательное подавление трансляции вирусных матриц обусловлено либо большей чувствительностью вирусной системы трансляции к фосфорилированию инициирующего фактора, либо специфическим выключением трансляции зараженной клетки.  
 
Кроме того, активируется специфическая внутриклеточная рибонуклеаза, приводящая к быстрой деградации матричных РНК вируса.  
 
С этих позиций легко объяснить антивирусный и антипролиферативный эффекты ИФН: ингибирование процессов транскрипции и трансляции обусловливает прекращение репликации вирусов (антивирусный эффект) или торможение размножения клеток (антипролиферативный эффект).  
 
Было установлено, что рекомбинантные интерфероны активируют лизис и переваривание золотистого стафилококка, хламидий, легионелл, токсоплазм, листерий и кандид. Механизм бактерицидной и фунгицидной активности аналогов природного интерферона состоит в активации трансмембранного и ци-тозольного потока ионов Са*, в дозозависимом усилении фагосомальной активности и фагоцитоза, стимуляции респираторного взрыва.  
 
Перечисленные эффекты, присущие ИФН, делают их универсальным фактором неспецифической резистентности, обеспечивающим защиту организма от чужеродной информации (вирусы, бактерии, хламидий, микоплазмы, патогенные грибы).  
 
Кроме непосредственного действия на системы репродукции вирусов, ИФНы являются важными медиаторами иммунитета, что позволяет отнести их к семейству регуляторных цитокинов. Среди проявлений иммуномедиаторных свойств ИФНов особо стоит выделить следующие:  
 
1. Под действием ИФНа увеличивается число Fc-рецепторов к IgG на мембранах макрофагов, что способствует выполнению ими таких важных функций как фагоцитоз и антителозависимую цитотоксичность (Vogel J. et al., 1983).  
 
2. ИФН-р является мощным ингибитором Т-супрессоров, а ИФН-у—активирует их и инициирует синтез растворимого фактора супрессии иммунного ответа (Мота Т., Dorf M., 1985).  
 
3. ИФНы являются основными модуляторами системы естественной цито-токсичности, воздействуя на активность естественных киллеров (Herberman R. et al., 1982).  
 
4. Усиливается экспрессия на поверхности клеток антигенов гистосовмес-тимости I класса под действием ИФН-а и ИФН-р" (Zinkernagel R., Doherty P., 1974).  
 
5. Усиливается экспрессия антигенов гистосовместимости II класса под действием ИФН-у(ВазпатТ.У., MeriganT.C., 1983), что приводит к увеличению функциональной активности антиген-презентирующих клеток, усилению сенсибилизации Т-хелперов, увеличению цитотоксичности моноцитов, повышению секреции других лимфокинов, таких как фактор некроза опухоли и интерлейкин-2 (Blackman M., Morris А., 1985).  
 
Биологическое действие интерферонов характеризуется:  
 
- универсальностью (ИФН активен против многих ДНК- и РНК-содержа-щих вирусов);  
 
- выраженной тканевой специфичностью (ИФН высокоактивен в гомологичных системах, мало или неактивен в гетерологичных);  
 
- последействием (даже после удаления ИФНа в обработанных клетках сохраняется способность подавлять размножение вирусов);  
 
- внутриклеточной активностью (ИФН действует на вирусы лишь в процессе их репродукции);  
 
- необходимостью полноценного метаболизма клеток (действие ИФНа снимается ингибиторами синтеза белка и нуклеиновых кислот);  
 
- дискретностью (ИФНы не чувствительны к антителам против вирусов, его индуцирующих).  
 
Многообразие обнаруженных и изученных к настоящему времени функций и свойств ИФНа указывает на их контрольно-регуляторную роль в сохранении гомеостаза.  
 
Выявлены прямые и обратные связи системы интерферона с системой иммунитета и нейроэндокринной системой.  
 
В настоящее время производятся следующие генно-инженерные препараты интерферонов: отечественные препараты Реаферон, Реальдирон, Реколин, а также зарубежные — Интрон А, Роферон, Инрек.  
 
Определены показания и противопоказания для клинического применения ИФНов.  
 
ИФНы вводили подкожно, внутримышечно, внутривенно в больших дозах — до 10x106 ME в сутки, в основном при онкологических заболеваниях и вирусных гепатитах. Наряду с высокой клинической эффективностью ИФНов при их применении часто наблюдаются побочные эффекты в виде гриппоподобного синдрома, артралгии, депрессивных состояний, диареи. У 30% больных при длительном применении больших доз рекомбинантных ИФНов образовывались нейтрализующие антивирусную активность ИФНа антитела, что сопровождалось развитием резистентности к рекомбинантным ИФНам.  
 
В 60-х годах были опубликованы работы д-ра Грессера, в которых обосновывались необходимость тщательного исследования и длительного клинического наблюдения применения интерферонов у детей, особо в период новорож-денности.  
 
Введение одинаковой дозы интерферона на единицу массы тела, безопасной для половозрелых животных (крысы, мыши), приводило к диффузным некрозам печени, гломерулонефритам (как отсроченный эффект) и гибели новорожденных животных. Такая же картина наблюдалась и при индукции эндогенного интерферона. Антитела к интерферонам снимали этот эффект. Механизм патологического действия интерферона на развивающийся организм был неизвестен. Применение препаратов ИФНа у детей, особенно в период новорожденное, составляло один из наименее изученных разделов интерферонологии.  
 
ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМЫ ИНТЕРФЕРОНА.  
 
В целях обоснования применения интерферонов в педиатрической практике было необходимо изучить становление системы интерферона в онтогенезе. Изучение возрастных особенностей системы ИФНа стало приоритетным для нашей страны. Развитие этого направления было начато в 70-х годах с работ академика В.Д. Соловьева и профессора Т.А. Бектемирова и позже продолжено в лаборатории «Онтогенез и коррекция системы интерферона» в НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН.  
 
В наших экспериментальных исследованиях было установлено, что клетки новорожденных животных (мыши, крысы) продуцировали «ранний интерферон» (р-ИФН), состоящий из 1 субъединицы с молекулярной массой 45-62 КД. Это отличало р-ИФН от интерферона, синтезируемого клетками половозрелых животных, который состоял из 2 субъединиц с молекулярной масеой 25-30 КД и 32-45 КД. Ранний ИФН обладал сниженными антипролиферативными, противовирусными и гидрофобными свойствами. Вероятно, действие р-ИФН было направлено, в основном, не на неспецифическую защиту организма, а на участие в размножении и дифференциации клеток плода. Были определены факторы, свидетельствующие о том, что созревание интерфероновой системы происходит поэтапно с переходом одного возрастного периода в другой. Так, в сыворотке крови новорожденных животных наблюдали факторы с молекулярной массой 15-18 КД, способствующие выходу из лизосом фермента катепси-на Д. Последний обусловливал модификацию молекулы интерферона предположительно на посттрансляционном уровне. Другой фактор, определяющий синтез р-ИФН, был взаимосвязан с липидной природой энергетической составляющей раннего этапа жизни организма. Изменение интенсивности пере-кисного окисления липидов (ПОЛ), ответственного за проницаемость клеточных мембран и, в частности, лизосом для катепсина Д, изменялось «буквально по дням». У новорожденных мышей сыворотка крови обладала 50% проокси-дантным действием, а 1-, 2- и 10-ти дневных сосунков — 3%, 14%, и 20-30% антиокислительной активностью (АОА) соответственно. Кроме того, по мере взросления организма происходила замена факторов с молекулярной массой 15-18 КД в сыворотке крови, повышающих выход из лизосом катепсина Д, на высокомолекулярные факторы с молекулярной массой 30-40 КД, ингибирую-щие выход катепсина Д из лизосом. Как следует из данных литературы, активация выхода катепсина Д из лизосом всегда взаимосвязана с процессами регенерации и активного размножения клеток. Если к клеткам брюшнополостно-го экссудата новорожденных добавляли сыворотку крови взрослых животных, содержащую факторы, ингибирующие выход катепсина Д из лизосом, и обладающую выраженной антиокислительной активностью, — происходил синтез «взрослого» интерферона (в-ИФН), состоящего из 2 субъединиц. Такая же картина наблюдалась, если к клеткам брюшнополостного экссудата новорожденных добавлялся антиоксидант — витамин Е.  
 
Исследования антивирусного действия интерферонов и их возможного побочного действия на развивающийся организм проводились на модели гриппозной инфекции у неполовозрелых животных. Введение р-ИФНа отражало активацию эндогенной системы интерферона, а применение в-ИФНа служило моделью экзогенной интерферонотерапии. В процессе развития инфекции происходило снижение АОА плазмы крови и усиление перекисное окисление ли-пидов (ПОЛ) мембран клеток, что повышало текучесть мембран клеток, увеличивая их проницаемость, в частности, и для катепсина Д. В этих условиях усиливалось и действие низкомолекулярных факторов, интенсифицирующих выход катепсина Д из лизосом. В конечном счете действие комплекса указанных факторов приводило к увеличению доли р-ИФНа в общем пуле продукции интерферона. Конечный метаболизм р-ИФНа в связи сего низкой гидрофобнос-тью осуществлялся в почках путем фагоцитоза.  
 
При развитии инфекционного процесса чувствительность ткани почек к ПОЛ усиливалась на фоне нарастания концентрации конечных продуктов ПОЛ. Поэтому дополнительная индукция ПОЛ, происходящая при фагоцитозе ИФНа, приводила к дегенеративным изменениям ткани почек (данные пато-морфо-логических исследований). Катаболизм в-ИФН, синтезированного клетками половозрелых животных, как более гидрофобного, происходил в клетках печени. При моделировании инфекционного процесса ткань печени, аналогично почечной ткани, проявляла повышенную чувствительность по отношению к усилению процессов ПОЛ. Поэтому конечный катаболизм ИФНа приводил к нарушению целостности мембран гепатоцитов, что регистрировалось по усилению концентрации в сыворотке крови пятого изофермента лактатдегидрогенезы. При сочетанном введении интерферонов с природным антиоксидантом витамином Е побочных эффектов интерферонов на паренхиматозные органы не наблюдалось.Кроме того, значительно усиливалась противовирусная активность как р-ИФНа, так и в-ИФНа.  
 
Таким образом, в результате наших экспериментальных исследований установлены механизмы токсического действия ИФНов на растущий организм. Выявлены некоторые закономерности, лежащие в основе возрастных особенностей системы интерферона: в различные периоды онтогенеза продуцируются интерфероны, отличные по физико-химическим и биологическим свойствам. Показана целесообразность применения антиоксидантов для устранения побочных действий эндогенного и экзогенного интерферона на растущий организм.  
 
Комплексный подход к изучению проблемы позволил установить ряд механизмов сниженной неспецифической резистентности раннего этапа онтогенеза и ее взаимосвязь с несовершенством функционирования системы ИФНа. Особенно четко эта закономерность проявлялась в период новорожденное и у детей раннего возраста от 1 года до 3 лет (таблица 1).  
 
У человека появление так называемого «раннего» а-интерферона зафиксировано, начиная с 10 недели беременности. Интерферон в значительных количествах (1-10 МЕ/г) выявляется в крови, тканях легкого, сердца, кишечника, скелетных мышцах, костях и мозговой ткани плода. Большие количества интерферона определялись и в амниотической жидкости, т. е. развивающийся плод как бы «пропитан» и «окружен» интерфероном. На этом фоне эмбрион интенсивно развивается, атипролиферативные свойства интерферона не проявляются, интерферон не может активировать натуральные киллеры (НК). Анализ имеющихся литературных данных позволяет рассматривать направленность действия «раннего» ИФНа не столько на защиту, сколько на размножение и дифференциацию клеток плода. У новорожденных детей в сыворотке крови циркулирует значительное количество «раннего» интерферона. Наибольшее его количество определяется у глубоконедоношенных детей. Установлена взаимосвязь снижения уровня продукции «раннего» ИФНа с отклонениями от нормы развития плода у беременных женщин.  
 
В становлении противоинфекционной защиты организма в период новорожденное™ принимает участие только а-звено интерфероновой системы. Однако синтез а-ИФНа значительно снижен, особенно у глубоконедоношенных детей (таблица 1). Уменьшение способности новорожденных к синтезу а-ИФНа обуславливало нарушение показателей иммунорегуляторного индекса в сторону преобладания супрессорной активности Т-лимфоцитов и снижения кил-  
 
Таблица 1.  
 
Возрастные особенности системы интерферона  

Примечание. * Ранний период ,** Начало переходного периода , *** Переходный период.  
 
лерной активности клеток. Сниженная способность к синтезу-r-интерферона и своеобразие его действия были физиологически обусловлены и отражали длительную ингибицию отторжения плода. Однако -у-ИФН, так же как и «ранний» а-ИФН, принимал участие в развитии плода, но необходимы были лишь низкие количества (единицы) ИФНа. Из всех типов ИФНа только у-ИФН участвовал в созревании эритроцитов. Несколько единиц у-ИФНа подавляли экспрессию гена фетального гемоглобина в эритроцитах. При этом тотальная продукция гемоглобина не изменялась вследствие эквивалентного усиления синтеза р-гемоглобина. Действие -у-ИФНа было специфичным и зависело от возрастных характеристик эритроидных предшественников. Синтез фетального гемоглобина значительно (на 38%) снижался, если эритробласты имели неонаталь-ное происхождение, и оставался неизменным, если эритробласты получали из печени плода со сроком беременности 18-21 неделя.  
 
Особое значение для функционирования системы ИФНа имела интенсивность перекисного окисления липидов мембран клеток. Отмечалась прямая зависимость снижения с возрастом ПОЛ и циркуляции «раннего» а-ИФНа и обратная — в отношении продукции у-ИФНа.  
 
Усиленное образование продуктов перекисного окисления липидов на раннем этапе жизни организма физиологически обусловлено, так как липиды в этот период являются основной составляющей энергетического обмена. Одновременно отмечается гиповитаминоз Е и дисбаланс ферментных систем, участвующих в антиокислительной защите организма. При развитии инфекционных заболеваний интенсивность ПОЛ возрастала. При этом отмечалась обратно пропорциональная ингибиция синтеза ИФНа и увеличение в общем пуле «раннего» ИФНа. Исследования in vivo показали, что применение ИФНа вместе с антиоксидантами на этом этапе развития корригирует нарушенное функционирование системы ИФНа. Участие антиоксидантов в интерферонотера-пии предупреждало развитие возможных побочных эффектов ИФНа на развивающийся организм.  
 
У детей следующей возрастной группы — от 1 года до 3 лет — свойства ИФНов соответствовали таковым взрослого организма. Не наблюдалось цир-кулирования «раннего» ИФНа, у-ИФН проявлял способность активировать кил-лерную активность клеток, происходил синтез а-ИФНа, участвующего в проти-воинфекционной защите организма. Однако, синтез интерферонов был резко снижен и также зависел от состояния равновесия в системе перекисное окисление липидов— антиокислительная активность (ПОЛ-АОА).  
 
У детей младшего школьного возраста синтез ИФНов тоже не достигал уровня взрослых доноров. Биологические свойства интерферонов были аналогичны таковым взрослого организма.  
 
Условно развитие системы ИФН можно разделить на 3 периода: ранний период (период новорожденное™); начало переходного периода (дети раннего возраста); переходный период (дети младшего школьного возраста).  
 
Установлено, что при любом инфекционном процессе синтез интерферонов значительно нарушался.  
 
Исследования in vitro показали, что способность к продукции ИФНов значительно повышалась при добавлении к ИФН-продуцирующим клеткам а-токо-ферола ацетата. При выраженной степени инфекционного процесса для повышения синтеза ИФНов клетками крови необходимо было внесение двух антиоксидантов — остокоферола ацетата и аскорбиновой кислоты. По-видимому, а-токоферол ацетат частично окислялся активно образующимися в этих случаях продуктами ПОЛ, и аскорбиновая кислота восстанавливала активный центр а-токоферол ацетата, пролонгируя его действие.  
 
Приведенные данные свидетельствуют, что ИФНы принимают участие не только в защите организма от инфектов, но и участвуют в развитии различных физиологических процессов на разных этапах развития организма.  
 
ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ СОЗДАНИЯ ПРЕПАРАТА ВИФЕРОН  
 
В экспериментальных и клинических наблюдениях были определены основные подходы к применению ИФНов в педиатрической практике. Один из них — необходимость сочетания ИФНа с препаратами антиоксидантного действия. В поиске оптимального состава комплексного препарата был использован созданный в России рекомбинантный интерферон а2Ь (Р-ИФН), а применение формулы индекса эффективности сочетания препаратов позволило провести скрининг различных препаратов с антиоксидантным действием. Установлено, что использование Р-ИФНа с антиоксидантами (витаминами Е и С) оказывало синергидное действие на противовирусный эффект Р-ИФН. Сочетание с одним антиоксидантом усиливало противовирусное действие ИФНа в 7 раз, а с двумя — в 14 раз.  
 
В экспериментах на половозрелых и новорожденных кроликах, а также в наблюдениях на добровольцах был разработан ректальный способ введения ИФНов. Как показали наблюдения на добровольцах, введение интерферона ректально позволило достичь более высокой концентрации ИФНа в сыворотке крови и обеспечить более длительное его присутствие в крови, чем при парентеральных методах введения.  
 
Эти исследования послужили основой для создания нового комплексного препарата Виферон — суппозитории, в состав которых входит рекомбинантный интерферон «2Ь, витамины Е и С в терапевтически эффективных дозах.  
 
Комплексное действие Виферона обусловливает множественность эффектов: снижение уровня циркулирующего «раннего» ИФНа, усиление синтеза <х-ИФНа; увеличение количества и функциональной активности Т-клеточного звена иммунитета, нормализация показателей гуморального иммунитета, отсутствие присущих ИФНам побочных эффектов; отсутствие образования антител, нейтрализующих антивирусную активность Р-ИФНа; оптимальную, в сравнении с другими способами введения, фармакокинетику.  
 
Изучение показателей ИФН статуса в динамике показало, что Виферон очень быстро (в первые часы после введения) активизирует функционирование эндогенной системы ИФНа в отношении как а-, так и -у- интерфероногене-за, т. е. препарат совмещает способность заместительной терапии с индукцией эндогенной системы интерферона.  
 
Виферон выпускается в трех вариантах: Виферон-1, Виферон-2, Виферон-3.  
 
Виферон-1 содержит человеческий рекомбинантный интерферон-а2 в количестве 150 000 ME (международных единиц) ИФНа в одной свече.  
 
Виферон-2 содержит человеческий рекомбинантный интерферон-а2 в количестве 500 000 ME ИФНа в одной свече.  
 
Виферон-3 содержит человеческий рекомбинантный интерферон-а2 в количестве 1 000 000 ME ИФНа в одной свече.  
 
Виферон-1 назначается детям до 7 лет, детям старше 7 лет — Виферон-2. Виферон-3 назначается преимущественно для лечения вирусных гепатитов у детей.  
 
В состав всех вариантов Виферона помимо рекомбинантного интерферо-на-а2 входят антиоксиданты — а-токоферола ацетат (витамин Е) и аскорбиновая кислота (витамин С) в терапевтически эффективных дозах.  
 
Многолетние фундаментальные исследования, доказавшие необходимость антиоксидантной коррекции функционирования системы ИФН, позволили впервые применить Виферон в педиатрической практике, в том числе у новорожденных недоношенных детей, а также у беременных женщин при инфекционной патологии.  
 
ПРИМЕНЕНИЕ ВИФЕРОНА ПРИ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ В ПЕРИОД НОВОРОЖДЕННОСТИ  
 
Виферон положительно зарекомендовал себя при лечении вирусных и бактериальных инфекций у новорожденных: ОРВИ, сепсис, пневмония, специфические внутриутробные инфекции (хламидиоз, герпес, цитомегалия, уреаплаз-моз, микоплазмоз, инфекционные поражения ЦНС). Результаты проведенного анализа, основанного на непараметрических статистических критериях, показали четкую корреляционную взаимосвязь между различными факторами специфической, неспецифической и антиоксидантной защиты организма, корригируемой Вифероном (а-ИФН, IgG, интенсивность фагоцитоза, R-белки, МДА, АОА). Анализ данных клинической эффективности включения Виферона в общепринятую терапию заключался в более быстром разрешении патологического очага, уменьшении длительности инфекционного токсикоза. Применение Виферона также способствовало сокращению длительности антибактериальной терапии (на 10 дней) и ее массивности (в 2-3-раза), снижению случаев хрониза-ции патологического процесса и случаев развития дисбактериоза, значительному снижению (в 2,5 раза) необходимости переливания крови и плазмы.  
 
Выраженный эффект наблюдался при пневмонии хламидийной этиологии у глубоконедоношенных детей, находящихся на искусственной вентиляции легких. У детей, получавших Виферон, хламидийный антиген не выявлялся уже через 4 недели, тогда как в группе сравнения он присутствовал в течение 5 месяцев.  
 
У новорожденных, родившихся от матерей с вирусовыделением во время беременности и леченных Вифероном, отмечалась нормализация повышенных в результате внутриутробного инфицирования сывороточных IgA и IgM, a также увеличение уровня у-интерферона до 32 ME при исходном значении 2-4 ME. Последнее, вероятно, связано со стимуляцией Вифероном выработки цитокинов, что подтверждает усиление рецепторов для ИЛ-2 после курса ви-феронотерапии. Катамнестические наблюдения за детьми показали, что все новорожденные дети, получавшие в течение первых 5 дней после рождения Виферон, в течение первого месяца жизни в 6 раз реже болели инфекционно-воспалительными заболеваниями, чем дети группы сравнения.  
 
У детей с менингитами различной этиологии при виферонотерапии на 2 недели раньше, чем в группе сравнения нормализовались показатели цитоза в ликворе. Одновременно отмечалось более быстрое (через 3 часа после начана курса Виферона) усиление способности клеток крови и ликвора к продукции а-ИФНов. Через сутки синтез а-ИФНа клетками ликвора увеличивался примерно в 6 раз.  
 
Одновременно наблюдалась быстрая нормализация состояния системы ПОЛ-АОА как в ликворе, так и в плазме крови (табл. 2). АОА повышалась с 15% до 37% в ликворе и с 20% до 29% в плазме, а МДА снижался с 4 тМ/л до 2 тМ/л и с 13 тМ/л до 7 тМ/л, соответственно.  
 
У этой группы детей на две недели раньше, чем в группе сравнения, происходила нормализация цитоза в ликворе, и отмечалось значительно меньшее количество гнойных и неврологических осложнений. В группе сравнения на этот срок наблюдения показатели системы ИФНа были значительно снижены, наблюдался дисбаланс в системе ПОЛ-АОА и значительное нарушение цитоза в ликворе.  
 
Установлен выраженный положительный эффект Виферона при включении в терапию сепсиса, осложненного острым (подострым) ДВС-синдромом у новорожденных детей.  
 
В лабораторных исследованиях у данного контингента больных обнаруживалась анемия 2-3 степени, тромбоцитопения, нейтрофильный лейкоцитоз, моноцитопения, а также разнонаправленные сдвиги в системе гемостаза с прогрессирующей тромбоцитопенией. В 100% случаев среди клинических проявлений септического процесса на первый план выступали признаки генерали-зованного инфекционного токсикоза. В 80% случаев длительные нарушения приводили к необходимости проведения искусственной вентиляции легких  
 
Таблица 2.  
 
Показатели перекисного окисления липидов (МДА) и антиокислительной активности (АОА) в цереброспинальной жидкости и в плазме крови новорожденных с инфекционными заболеваниями ЦНС до и после лечения Вифероном