Определение чистоты лекарственных средств химическими, физическими и физико-химическими методами анализа

Результаты  испытания считаются достоверными, если на хроматограмме из общей точки нанесения четко видны два полностью разделенных пятна.

Метод ВЭЖХ

Буферный  раствор срН 7,0. 6,0 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в 1000 мл воды, прибавляют 1 мл триэтиламина и доводят рН раствора 10 % раствором натрия гидроксида до значения 7,0.

Испытуемый  раствор. 0,050 г субстанции растворяют в 10 мл метанола. Раствор анализируют тотчас же.

0,05 % раствор 4-аминоантипирина. 0,010 г 4-аминоантипирина растворяют в 20 мл метанола.

Раствор сравнения. 1 мл 0,05 % раствора 4-аминоантипирина разводят метанолом до 20 мл.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,02 г субстанции растворяют в 10 мл метанола и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин, охлаждают и разводят метанолом до 20 мл. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 0,05 % раствора 4-аминоантипирина и перемешивают.

 

Условия хроматографирования

Колонка - 25 х 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (С₁₈),

5 мкм;

Подвижная фаза

(ПФ) - буферный раствор с рН 7,0 - метанол (72:28);

Скорость  потока - 1,0 мл/мин;

Детектор - спектрофотометрический, 254 нм;

Объем пробы - 10 мкл.

Хроматографируют  раствор для проверки пригодности  системы. На хроматограмме должно наблюдаться 3 пика с относительными временами удерживания 1,0 (анальгин), около 1,4 (4-аминоантипирин) и около 2,0 (4-метиламиноантипирин). Разрешение (К.) между пиками анальгина и 4-аминоантипирина должно быть не менее 2,2; между пиками 4-аминоантипи-рина и 4-метиламиноантипирина - не менее 3,0.

Последовательно хроматографируют раствор сравнения  и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 1,5 раза превышать время удерживания пика 4-метиламиноантипирина.

На хроматограмме  испытуемого раствора площадь пика 4-метиламиноантипирина должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %), площадь пика любой другой примеси должна быть не более 40 % от площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %), суммарная площадь пиков примесей должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %). Не учитывают пики, площадь которых составляет 5 % и менее от площади пика на хроматограмме раствора сравнения.

Потеря  в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе должна быть не менее 4,7 % и не более 5,5 %.

Хлориды. 0,5 г субстанции помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведенной 16% и осторожно кипятят в течение 5 мин. После охлаждения раствор переносят в пробирку, содержащую 0,15 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, доводят объем раствора водой до 10 мл и через 1 мин просматривают в проходящем свете.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Не должно быть опалесценции, превышающей опалесценцию контрольного опыта.

Сульфаты. 0,1 г субстанции растворяют в 10 мл воды и тотчас же проводят испытание (не более 0,1 % в субстанции).

Тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Остаточные  органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,14 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 10 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 4 раза.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной  для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая  чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное  определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции помещают в сухую колбу, прибавляют 20 мл спирта 96 %, 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и тотчас титруют 0,1 М раствором йода при перемешивании до появления желтой окраски, не исчезающей в течение 30 с.

1 мл 0,1 М раствора  йода соответствует 16,67 мг С₁₃Н_]6N₃NaО₄S.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

 

Ф А Р М А К  О П Е Й Н А Я    С Т А Т Ь Я

АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВАЯ КИСЛОТА (ОФС 42-022007) Кислота 2-ацетоксибензойная

 

C₉H₈O₄                                                                                                       М.м. 180,15

Содержит не менее 99,5 % С₉Н₈О₄ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха или со слабым запахом.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в хлороформе, в растворах щелочей едких и углекислых, мало растворим в воде.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см'1, по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра ацетилсалициловой кислоты (Приложение 1).

Ультрафиолетовый  спектр поглощения 0,007 % раствора субстанции в хлороформе в области от 260 до 350 нм должен иметь максимум при 278 нм.

Ультрафиолетовый  спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в 0,1 М растворе серной кислоты в  области от 220 до 350 нм должен иметь  максимумы при 228 нм и 276 нм и минимум 257 нм.

0,5 г субстанции кипятят в течение 3 мин с 5 мл раствора натрия гидроксида, охлаждают, нейтрализуют серной кислотой разведенной 16 %; образуется белый кристаллический осадок. К осадку прибавляют 0,1 мл раствора железа(Ш) хлорида; появляется фиолетовое окрашивание.

К 0,2 г субстанции прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, перемешивают, прибавляют 0,1 мл воды; появляется запах уксусной кислоты. Прибавляют 0,1 мл формалина; появляется розовое окрашивание.

Прозрачность  раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл спирта 96 % должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9.

Вещества, нерастворимые в растворе натрия карбоната. 0,5 г субстанции растворяют в 10 мл теплого 10 % раствора натрия карбоната. Полученный раствор должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Салициловая кислота свободная. Испытуемый раствор. Около 0,3 г субстанции (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 10 мл спирта 96 %, прибавляют 1 мл 0,2 % раствора квасцов железоаммониевых, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. Около 0,06 г (точная навеска) стандартного образца салициловой кислоты (стандарт ВР или аналогичного качества) помещают в мерную колбу вместимостью 1 00 мл, растворяют в спирте 96 %, доводят объем раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 39 мл спирта 96 %, 4 мл 0,2 % раствора железоаммониевых квасцов и количественно разбавляют водой до 1 00 мл.

Используют  свежеприготовленные растворы.

Измеряют  оптическую плотность испытуемого и стандартного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм.

Содержание  салициловой кислоты свободной  в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле.

Посторонние примеси. Испытуемый раствор. 0,1 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в ацетонитриле и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения. 0,05 г салициловой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в подвижной фазе (ПФ) и доводят объем раствора ПФ до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,01 г стандартного образца салициловой кислоты (стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 1 0 мл ПФ. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 1 00 мл, прибавляют 0,2 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки.

Используют  свежеприготовленные растворы.

Хроматографические условия

Колонка   - 15 х 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (С 18),

5 мкм;

ПФ   - фосфорная кислота концентрированная

  - ацетонитрил

                                      - вода (1:200:300);

Скорость  потока -1,0 мл/мин;

Детектор   - спектрофотометрический, 237 нм;

Объем пробы       - 10 мкл.

Хроматографируют  раствор для проверки пригодности  хроматографической

системы. Разрешение меду пиками ацетилсалициловой кислоты  и салициловой кислоты должно быть не менее 6.

Хроматографируют  испытуемый раствор и раствор сравнения. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 7 раз превышать время удерживания пика ацетилсалициловой кислоты.

На хроматограмме  испытуемого раствора площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %); суммарная площадь пиков примесей должна быть не более двух с половиной кратной площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %).

Хлориды. 1,5 г субстанции взбалтывают в течение 2 мин с 30 мл воды и фильтруют. 10 мл фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,004 % в субстанции).

Сульфаты. 10 мл фильтрата, полученного в испытании на Хлориды, должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02 % в субстанции).

Потеря  в массе при высушивании. Около 1 г субстанции (точная навеска) сушат при температуре от 80 до 85 °С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5 %.

Сульфатная  зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции (точная навеска) не должна превышать 0,1 % и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Остаточные  органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая  чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное  определение. Около 0,5 г субстанции (точная навеска) растворяют в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину и охлажденного до температуры 8-10 °С спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор - 0,1 мл 1 % раствора фенолфталеина).

1 мл 0,1 М раствора  натрия гидроксида соответствует  18,02 мг C₉H₈O₄.

Хранение. В сухом месте.

Ф А Р М  А К О П Е Й Н А Я   С Т А Т Ь Я

 

ГАЛОПЕРИДОЛ (ФС 42-0225-07)

4-[4-Гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидино]-4'-фторбутирофенон

Содержит  не менее 99,0 % и не более 101,0 % С₂₁Н₂₃С1FNO₂ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, растворим в хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см"1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца галоперидола.

0,01 г субстанции  растворяют в смеси спирт 96 % - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (9:1) и разбавляют той же смесью до 50 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют смесью спирт 96 % 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (9:1) до 100 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 245 нм.

0,1 г субстанции  сплавляют на открытом пламени  с 0,5 г безводного натрия карбоната  и охлаждают. Остаток взбалтывают  с 5 мл азотной кислоты разведенной 16 % и фильтруют. Фильтрат дает характерную реакцию на хлориды.

Температура плавления. От 149 до 153 °С.

Прозрачность  раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 20 мл 0,5 % раствора молочной кислоты должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном Y7.

4,4'-Бис|4-(4-хлорфенил)-гидроксипиперидино]бутирофенон. 0,05 г субстанции (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 30 мл метанола, прибавляют 5 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объем раствора метанолом до метки. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная на спектрофотометре при 335 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, должна быть не более 0,3 (не более 1 %).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ. Растворы готовят непосредственно перед использованием, защищая от света.

Испытуемый  раствор. 0,1 г субстанции растворяют в метаноле и разбавляют метанолом до 10 мл.

Раствор сравнения. 5 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора метанолом до метки. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объем раствора метанолом до метки.