Определение чистоты лекарственных средств химическими, физическими и физико-химическими методами анализа

Раствор для проверки пригодности системы. 0,005 г субстанции и 0,0025 г стандартного образца бромперидола (стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 50 мл метанола.

Хроматографические  условия

Колонка - 10 х 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (С 18),

3 мкм;

Подвижная фаза   - А - 1,7 % раствор тетрабутиламмония  гидросульфата; 
(ПФ) Б - ацетонитрил;

Скорость  потока    - 1,5 мл/мин;

Детектор  - спектрофотометрический, 230 нм;

Объем пробы         - 10 мкл.

Хроматографический режим

Время (мин)	% ПФ  А	% ПФБ	Режим
0-15	90^50	90=>50	линейный  градиент
15-20	50	50	изократическии
20-25	90	10	переход к  начальному составу
25-0	90	10	начало новой  программы

Хроматографируют  раствор для проверки пригодности  хроматографической системы. Времена удерживания: галоперидол - около 5,5 мин; бромперидол - около 6 мин. Разрешение (К.) между пиками галоперидола и бромперидола должно быть не менее 3,0.

Хроматографируют  раствор сравнения не менее 5 раз. Относительное стандартное отклонение площади пика галоперидола должно быть не более 5 %.

Хроматографируют  раствор сравнения и испытуемый раствор.

Площадь пика любой посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %); сумма площадей всех пиков посторонних примесей должна быть не более удвоенной площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1 %).

Потеря  в массе при высушивании. Около 1,0 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5 %.

Сульфатная  зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1,0 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1 % и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Остаточные  органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая  чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное  определение. Около 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 15 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 5 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

1 мл 0,1 М раствора  хлорной кислоты соответствует 37,59 мг С₂₁H₂₃ClFNO₂.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

 

 

Ф А Р М А К О  П Е Й Н А Я   С Т  А Т Ь Я

 

ГЛИКЛАЗИД (ФС 42-0228-07)

 

2 - [3 -(4-Толил сульфонил)уреидо] октагидроцикл опента[с] пиррол

Содержит не менее 99,0% и не более 101,0%  CHNOS в перерасчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см"¹ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца гликлазида.

Посторонние примеси. Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин - трифторуксусная кислота - ацетонитрил - вода (0,1:0,1:45:55).

Испытуемый  раствор. 0,05 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора смесью ацетонитрил - вода (9:11) до метки. 10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора смесью ацетонитрил - вода (9:11) до метки.

 

Раствор сравнения Б. 0,01 г стандартного образца примеси Р (1-(гексагидро-циклопента[с]-пиррол-2(1#)-ил)-3-[(2-метилфенил)сульфонил]мочевина, стандарт ВР или аналогичного качества) смесью ацетонитрил - вода (9: 1 1) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 45 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора смесью ацетонитрил - вода (9: 1 1) до метки.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,004 г субстанции и 0,015 г стандартного образца примеси Р (1-(гексагидроциклопента[с]пиррол-2(1Я)-ил)-3-[(2-метилфенил)сульфонил]мочевина, стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 25 мл ацетонитрила и разбавляют водой до 50 мл. 1 мл полученного раствора разбавляют смесью ацетонитрил - вода (9:11) до 20 мл.

Хроматографические  условия

Колонка

Скорость потока Детектор Объем пробы

25 х 0,4 см, с  октилсилил силикагелем (С8), 
5 мкм;

• 0,9 мл/мин;
• спектрофотометрический, 235 нм;
• 20 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Разрешение (К) между пиками гликлазида и примеси Р должно быть не менее 1,8.

Пять раз  хроматографируют растворы сравнения. Относительное стандартное отклонение для площади пика гликлазида и примеси Р должно быть не более 5,0 %.

Хроматографируют  растворы сравнения и испытуемый раствор и определяют площади пиков. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания основного пика.

Площадь пика примеси Р на хроматограмме испытуемого  раствора должна быть не более площади  пика на хроматограмме раствора сравнения  Б (не более 0,1 %).

Площадь пика любой другой примеси на хроматограмме  испытуемого раствора должна быть не более площади пика гликлазида на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %). Сумма площадей этих пиков на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более двукратной площади пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %).

Определение примеси В (2-нитрозооктагидроциклопента[с]пиррол) проводят методом ВЭЖХ в описанных выше условиях.

Испытуемый  раствор. 0,4 г субстанции растворяют в 2,5 мл диметилсульфоксида, разбавляют водой до 10 мл, перемешивают в течение 10 мин, выдерживают при температуре 4 °С в течение 30 мин и фильтруют.

Раствор сравнения. 0,02 г стандартного образца примеси В (стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в диметилсульфоксиде и разбавляют диметилсульфоксидом до 100 мл. К 1 мл полученного раствора прибавляют 12 мл диметилсульфоксида и разбавляют водой до 50 мл (раствор А). К 1 мл раствора сравнения А прибавляют 12 мл диметилсульфоксида и разбавляют водой до 50 мл.

Хроматографируют 50 мкл раствора сравнения Б и 50 мкл испытуемого раствора и определяют площадь пика примеси В. Площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,0002 %).

Потеря  в массе при высушивании. Около 1 г субстанции (точная навеска) сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,25 %.

Сульфатная  зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции

(точная навеска)  не должна превышать 0,1 % и должна  выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Остаточные  органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая  чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное  определение. Около 0,25 г субстанции (точная навеска) растворяют в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора  хлорной кислоты соответствует 32,34 мг С₁₅Н₂₁N_зО_зS.

Хранение. Список Б. В сухом, защищенном от света месте.

 

 

Ф А Р М А К О П Е Й  Н А Я  С Т А Т Ь Я

РИБОКСИН (ФС 42-0275-07)

9-(β-D-Рибофуранозил)-1H-пурин-6(9H)-он

М.м. 268,22

Содержит  не менее 96,0 % и не более 102,0 % С₁₀Н₁₂N₄О₅ в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно (медленно) растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см"¹ по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра рибоксина (Приложение 1).

Время удерживания  основного пика на хроматограмме  испытуемого раствора (раздел «Количественное определение») должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме стандартного раствора.

0,1 г субстанции  растворяют в 20 мл воды. К 2 мл  полученного раствора прибавляют 5 мл 0,1 % раствора железа(Ш) хлорида в хлористоводородной кислоте концентрированной и 5 мл 10 % раствора орцина в спирте 96 %. Смесь выдерживают в течение 20 мин в кипящей водяной бане; появляется зеленое окрашивание.

Прозрачность  раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В₉.

Удельное  вращение. От -47 до -54 ° в пересчете на сухое вещество (1 % раствор субстанции).

рН. От 4,8до 5,8 (1 % раствор).

Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Количественное определение».

Испытуемый  раствор. 0,05 г субстанции растворяют в 50 мл ПФ.

Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.

Хроматографируют  раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2 раза превышать время удерживания основного пика. Примеси гуанозина и гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора идентифицируют по хроматограмме раствора для проверки пригодности системы.

Сумма площадей пиков гуанозина и гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,5 %), сумма площадей пиков неидентифицированных примесей должна быть не более половины площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря  в массе при высушивании. Около 1 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 1,0 %.

Сульфатная  зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1 % и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Железо. Сульфатная зола из 2 г субстанции должна выдерживать испытание на железо (не более 0,0015 % в субстанции).

Медь.   1,5  г субстанции  прокаливают в   фарфоровом  тигле,   остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, разбавляют водой до 15 мл и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл 10 % раствора аммиака и фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

Остаточные  органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор  субстанции (концентрация 20 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 60 раз.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной  для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая  чистота. В соответствии с требованиями ОФС

«Микробиологическая чистота».

Количественное  определение. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Фосфатный буферный раствор с рН 5,5-5,6. 2,72 г калия фосфата однозамещенного растворяют в 700 мл воды, доводят рН раствора раствором калия гидроксида до 5,5-5,6, доводят объем раствора водой до 1000 мл, перемешивают, фильтруют и дегазируют.