Оксид азота и биоцидность фагоцитов крови и легких в патогенезе хронических обструктивных болезней легких

Таблица 1.

Общее количество лейкоцитов крови больных ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	Общее количество лейкоцитов, х109/л
		При поступлении	На 5-6 сутки
Контроль	19	4,09±0,32
ХНБ	16	6,84±0,36*	4,31±0,19**
ХОБ	13	8,17±0,53*	4,29±0,13**
БА в сочетании с ХНБ	17	7,26±0,36*	4,36±0,20**
БА в сочетании с ХОБ	14	8,19±0,47*	4,74±0,18**

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с группой контроля и ** - P<0,05 по сравнению с соответсвующими показателями при поступлении в стационар.

 

Как видно  из таблицы 1, количество лейкоцитов периферической крови здоровых доноров (контроль) в среднем составило 4,09±0,32х10⁹/л. При поступлении в стационар во всех обследуемых группах больных - ХНБ, ХОБ, БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ общее количество лейкоцитов крови превышало контрольное значение, соответственно, в 1,7, 2,0, 1,8 и 2,0 раза (во всех случаях P<0,05). Из этого видно, что в группах больных ХОБ и БА в сочетании с ХОБ отмечается более выраженный лейкоцитоз, тогда как у больных ХНБ и БА в сочетании с ХНБ выявлено менее выраженное изменение количества лейкоцитов крови.

Исследование общего анализа крови больных ХОБЛ непосредственно  перед проведением фибробронхоскопии (5-6 сутки после поступления в стационар) выявило снижение общего количество лейкоцитов до уровня контрольных значений в группах больных ХНБ, ХОБ и БА в сочетании с ХНБ, тогда как в группе больных БА в сочетании с ХОБ число лейкоцитов периферической крови превышало показатели в группе доноров в 1,2 раза (Р<0,05).

Параллельно с клинико-биохимическими исследованиями крови было проведено иммуноферментное определение содержания IgE в сыворотке крови и в БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ.

Известно, что в сыворотке  крови и БАЛ жидкости здоровых лиц содержание IgE в среднем составляет 68,1±5,4 Ед/л (Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., 1987). Как видно из таблицы 2, у больных ХНБ, ХОБ, БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ средние значения содержания IgE в сыворотке крови достоверно превышали максимальное значение нормативного показателя (во всех случаях P<0,05).

Таблица 2

Показатели IgE в сыворотке крови больных ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	IgE Ед/л
ХНБ	16	364,75±51,06*
ХОБ	13	365,27±54,79*
БА в сочетании с ХНБ	17	378,89±56,83*
БА в сочетании с ХОБ	14	261,19±39,18*
Нормативные показатели		68,1±5,4

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с нормативными показателями.

 

При этом индивидуальный анализ результатов исследования показал, что у 37,5% больных ХНБ содержание IgE в сыворотке крови находилось в пределах нормативных значений, тогда как у 62,5% превышало – от 1,9 до 9,9 раза. Содержание IgE в сыворотке крови у 53,8% больных ХОБ находилось в пределах нормативных значений, а у 47,2% превышало – от 2,3 до 12,1 раз. У 57,1% больных БА в сочетании с ХНБ содержание IgE находилось в пределах нормативных значений, тогда как у 42,9% превышало – от 2 до 12,4 раза. У 64,7% больных БА в сочетании с ХОБ содержание IgE находилось в пределах нормативных значений, тогда как у 35,3% превышало – от 1,1 до 11,1 раза.

Результаты определения IgE в БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ представлены в таблице 3.

Таблица 3

 

Показатели IgE в бронхоальвеолярной лаважной жидкости больных ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	IgE Ед/л
ХНБ	16	128,67±19,3
ХОБ	13	429,37±64,4*
БА в сочетании с ХНБ	17	212,77±31,9*
БА в сочетании с ХОБ	14	530,84±79,62*
Нормативные показатели		68,1±5,4

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с нормативными показателями.

 

Как видно из таблицы, у больных ХНБ средние значения содержания IgE в БАЛ жидкости больных ХНБ практически не отличались от нормативных значений. Индивидуальный анализ содержания IgE в БАЛ жидкости больных ХНБ показал, что у 37,5% уровень реагинов было выше, а в остальных случаях не отличался от нормативных показателей.

У больных ХНБ и  ХОБЛ средние значения содержания IgE в БАЛ жидкости во всех группах были выше нормативных значений. Однако достоверное повышение было отмечено только в группе больных ХОБ.

Индивидуальный анализ содержания IgE в БАЛ жидкости больных ХОБ показал, что у 58,3% уровень реагинов было выше, а в остальных случаях не отличался от нормативных показателей. У больных БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ, соответственно, в 25% и 39,5% содержание IgE в БАЛ жидкости превышало значение нормативных показателей. 

На рисунке 1 приведены  результаты сравнительного анализа  содержания IgE в сыворотке и в БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ.

Рисунок 1. Процентное соотношение больных с повышенным уровнем IgE в сыворотке крови и БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ.

 

Как видно из рисунка 1, в группе ХНБ уровень содержания IgЕ в БАЛ жидкости у 43,7%, а в сыворотке крови у 62,5% больных был выше верхнего уровня нормативных значений. В группе больных ХОБ повышенное содержание IgE в БАЛ жидкости было у 59,3%, а в сыворотке крови – у 47,2% пациентов. У больных БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ повышенный уровень содержания реагинов в легких, соответственно, составил у 25% и 39,5% случаев, а в крови – 42,9% и 35,3%.

Таким образом, средние значения содержания IgЕ в сыворотке крови у больных ХНБ и ХОБЛ достоверно были выше максимального нормативного значения. При этом наибольший процент больных с высокими значениями содержания IgE был у пациентов ХНБ, затем - у больных ХОБ, а наименьший – у больных БА в сочетании с ХОБ. У больных ХОБЛ средние значения содержания IgE в БАЛ жидкости во всех группах были выше нормативных значений. Однако достоверное повышение было отмечено только в группе больных ХОБ.

 

3.2. Потенциальная  биоцидная функция нейтрофилов крови и фагоцитов БАЛ жидкости больных хроническими обструктивными болезнями легких и больных хроническим необструктивным бронхитом

В данной главе представлены результаты исследования окислительно-метаболической функции нейтрофилов крови и БАЛ жидкости различных групп больных ХОБЛ и ХНБ. Оценку окислительно-метаболической функции фагоцитов крови и БАЛ жидкости во всех исследуемых группах больных проводили с помощью спонтанного и зимозан-индуцированного ХЛ исследования.

 

 

 

 

3.2.1. Спонтанный ХЛ ответ

В таблице 4 представлены результаты исходной окислительно-метаболической активности нейтрофилов крови больных  ХНБ и ХОБЛ, определяемой при проведении с-ХЛ исследования.

Таблица 4

Показатели спонтанного  ХЛ ответа нейтрофилов крови больных  ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	Imax с-ХЛ (имп/Нф/мин)
ХНБ	16	0,011±0,003
ХОБ	13	0,007±0,001*
БА в сочетании с ХНБ	14	0,013±0,003
БА в сочетании с ХОБ	17	0,011±0,002

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с показателями больных ХНБ.

 

Как видно из таблицы, в группе ХНБ число импульсов  на пике с-ХЛ излучения одним нейтрофилом в среднем составило 0,011±0,003 имп/Нф/мин.

Значения с-ХЛ у больных  ХОБ в среднем составили                    0,007±0,001 имп/Нф/мин, что было в 1,5 раза (P<0,05) ниже показателей в группе больных ХНБ. В группе больных БА в сочетании с ХОБ средние значения             с-ХЛ ответа нейтрофилов крови практически не отличались от показателей больных ХНБ. В группе БА в сочетании с ХНБ показатели исходной окислительно-метаболической активности нейтрофилов (с-ХЛ) крови в 1,2 раза были выше значений, чем в группах ХНБ  и БА в сочетании с ХОБ, и в 1,86 раза выше, чем у больных ХОБ.

В таблице 5 представлены значения исходной окислительно-метаболической активности фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ.

 

Таблица 5

Показатели спонтанного  ХЛ ответа фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	Imax с-ХЛ (имп/клетка/мин)
ХНБ	16	0,32±0,2
ХОБ	13	0,071±0,013*
БА в сочетании с ХНБ	14	0,15±0,05*
БА в сочетании с ХОБ	17	0,28±0,075*

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с группой больных ХНБ.

 

Так, в группе больных  ХНБ число импульсов на пике с-ХЛ излучения одним фагоцитом (I_max) в среднем составило 0,32±0,2 имп/клетка/мин. Показатели I_max с-ХЛ фагоцитов БАЛ жидкости у больных ХОБ в среднем составили 0,071±0,013 имп/клетка/мин, что было ниже показателей в группе больных ХНБ, БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ, соответственно, в 4,5, 2,11 и 3,9 раза (во всех случаях P<0,05). 

Сравнительный анализ результатов  спонтанного ХЛ ответа нейтрофилов  крови и фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ, приведенных  в табл. 4 и 5 показал, что легочные фагоциты продуцировали АМК на порядок  больше, чем нейтрофилы периферической крови.

Таким образом, у больных  ХНБ, БА в сочетании с ХНБ и БА в сочетании с ХОБ исходное состояние окислительно-метаболической функции нейтрофилов крови были приблизительно равными и были достоверно выше, чем у больных группы ХОБ. Исследование окислительно-метаболической функции фагоцитов БАЛ жидкости больных ХОБЛ показало, что у больных ХОБ отмечается минимальная ее активность, а максимальные значения с-ХЛ ответа были у больных ХНБ и БА в сочетании с ХОБ. У больных БА в сочетании с ХНБ с-ХЛ ответ фагоцитов БАЛ жидкости был ниже, чем у больных ХНБ и БА в сочетании с ХОБ, но выше, чем у больных ХОБ. В то же время была выявлена широкая вариабельность с-ХЛ ответа фагоцитов БАЛ жидкости у больных ХНБ.

 

3.2.2. Зимозан-индуцированный ХЛ  ответ 

Для оценки индуцированного ХЛ ответа нейтрофилов крови и фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ использовали дрожжевой полисахарид – зимозан (Маянский Д.Н. и соавт., 1996).

Таблица 6

Показатели зимозан-индуцированного  ХЛ ответа нейтрофилов крови больных  ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	Imax и-ХЛ (имп/Нф/мин)
ХНБ	16	1,14±0,36
ХОБ	13	1,56±0,57
БА в сочетании с ХНБ	14	1,54±0,53
БА в сочетании с ХОБ	17	3,01±0,45*

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с группой больных ХНБ.

 

Как видно из таблицы 6, показатели зимозан-индуцированного  ХЛ ответа (и-ХЛ) нейтрофилов крови  больных группы ХНБ в среднем  составили 1,14±0,36 имп/Нф/мин. В группе больных ХОБ и БА в сочетании с ХНБ значения и-ХЛ ответа нейтрофилов были достоверно выше соответствующих цифр в группе больных ХНБ в 1,36 и в 1,35 раза. В то же время, наибольшее значение и-ХЛ ответа нейтрофилов крови было выявлено у больных БА в сочетании с ХОБ (3,01±0,45 имп/Нф/мин), что в 2,6 раза (P<0,05) было выше, чем в группе больных ХНБ.

В таблице 7 представлены средние значения показателей зимозан-индуцированного ХЛ-ответа (и-ХЛ) фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ. 

Таблица 7

Показатели зимозан-индуцированного  ХЛ ответа фагоцитов БАЛ жидкости больных ХНБ и ХОБЛ (М±m)

Группы больных	n	Imax и-ХЛ (имп/клетка/мин)
ХНБ	16	2,24±0,34
ХОБ	13	0,66±0,11*
БА в сочетании с ХНБ	14	2,99±0,47
БА в сочетании с ХОБ	17	5,96±1,19

Примечание: n – количество обследованных больных; * - Р<0,05 по сравнению с группой больных ХНБ.

 

Как видно из таблицы, у больных группы ХНБ средние значения и-ХЛ ответа фагоцитов БАЛ жидкости составили 2,24±0,34 имп/клетка/мин. В группе больных ХОБ значения и-ХЛ ответа фагоцитов БАЛ жидкости в среднем составили 0,66±0,11 имп/клетка/мин, что было в 3,4 раза (P<0,05) ниже данного показателя в группе больных ХНБ.